课件：Targeting neuronal activity-regulated neuroligin-3 dependency in high-grade glioma.pptx

Targeting neuronal activity-regulated neuroligin-3dependency in high-grade gliomaNature September 2017IF：13.33分研究背景高级别胶质瘤（HGG）是一类恶性程度较高的脑肿瘤，是儿童和成人脑肿瘤相关死亡的主要原因。包括成人和儿童胶质母细胞瘤（GBM），间变性少突胶质瘤和弥漫内生性脑桥胶质瘤（DIPG）。知识点：弥漫内生性脑桥脑胶质瘤（DIPG）：是罕见的、频繁见于年轻儿童的脑瘤，平均发病年龄是5～9岁。预后不佳，平均生存期不足1年。化疗没有明确的作用。外照射放疗为主要的治疗手段。HGG各型5年生存率5年生存率不容乐观，迫切需要新疗法！研究背景该团队2015年的研究已发现大脑神经元活性会影响HGG生长，且发现了NLGN3的关键促生长作用然而，NLGN3蛋白的水解机制以及胶质瘤细胞中NLGN3的分子传导结果仍然未知！研究背景神经连接蛋白Neuroligin（NLGN）：是一种跨膜蛋白，是突触后膜上的细胞粘附蛋白，介导神经元之间突触的形成和维持。神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞等均可分泌该蛋白。NLGN还通过招募和稳定关键突触成分来调节信号传导。人类NLGN基因的改变与自闭症和其他认知障碍有关。研究过程及结果 NLGN3对HGG生长的促进作用与NLGN3功能相近的其他NLGN对HGG生长的影响NLGN3是NLGN家族中唯一促进HGG生长的蛋白！知识点：Optogenetic stimulation光遗传刺激：是指结合光学与遗传学手段，精确控制特定神经元活动的技术。该技术将外源光敏感蛋白基因导入活细胞中，在细胞膜结构上表达光敏感通道蛋白；然后通过特定波长光的照射，控制光敏感通道蛋白的激活与关闭；进而改变细胞膜电压的变化，如膜的去极化与超极化。实现神经元的激活或抑制。确定NLGN3对HGG生长的促进作用是否具有专一性表明在分子和临床上不同类型的HGG上对NLGN3具有保守依赖性NLGN3磷酸化PI3K-mTOR通路及其他致癌相关分子FAK磷酸化是NLGN3激活PI3K-mTOR通路的关键事件！知识点：PI3K-mTOR通路：磷脂酰肌醇3-激酶(PI3Ks)蛋白家族参与细胞增殖、分化、凋亡和葡萄糖转运等多种细胞功能的调节。PI3K活性的增加常与多种癌症相关。知识点：粘着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK):是一类胞质蛋白酪氨酸激酶,属于酪氨酸激酶超家族,也称为PTKⅡ。FAK在细胞信号转导中处于十分重要的位置,它是胞内外信号出入的中枢。FAK可以整合来自整合素、生长因子以及机械刺激等的信号，激活胞内PI3K-Akt、Ras-MAPK等多种信号通路，调节细胞生长。还与胚胎发育、肿瘤发生与迁移有关。对暴露于NLGN3的HGG细胞进行RNA测序表明NLGN3的生物学功能可能不仅是促进有丝分裂！确定NLGN3的蛋白水解和细胞代谢机制NLGN3在少突胶质细胞前体细胞（OPC）中高表达，光刺激促进其脱落，TTX抑制其脱落知识点：Tetrodotoxin,TTX河鲀毒素：是典型的钠离子通道阻断剂，它能选择性与肌肉、神经细胞的细胞膜表面的钠离子通道受体结合，阻断电压依赖性钠离子通道，从而阻断动作电位，抑制神经肌肉间兴奋的传导，导致与之相关的生理机能的障碍，主要造成肌肉和神经的麻痹。胶质瘤细胞是否有助于分泌NLGN3？胶质瘤细胞受正常基质细胞中的NLGN3调节，在肿瘤微环境中促进NLGN3的分泌进一步确定参与切割NLGN3的酶MMP9和ADAM10作为介导NLGN3切割的候选酶！预测底物切割位点上的24种不同蛋白激酶家族的初级序列.au/home.html知识点：1、去整合素金属蛋白酶（ADAM）：与基质金属蛋白MMP同为金属蛋白酶领域。在细胞黏附、细胞融合、细胞迁移、膜蛋白脱落和分解等生物学行为中起重要作用。其中ADAM10蛋白在多种肿瘤中有过表达现象，能与数种黏附分子和癌症信号分子相互作用，促进肿瘤的侵袭和转移。以调控ADAM10的表达为靶标，抑制肿瘤细胞的转移和侵袭有望成为肿瘤治疗的新策略。2、基质金属蛋白酶（MMPs）家族：因其需要Ca2+、Zn2+等金属离子作为辅助因子而得名。几乎能降解细胞外基质中的各种蛋白成分,破坏肿瘤细胞侵袭的组织学屏障，在肿瘤侵袭转移中起关键性作用，被认为是该过程中主要的蛋白水解酶。MMPs家族已分离鉴别出26个成员，编号分别为MMP1～26。药理抑制剂的交叉抑制可能，进一步确定NLGN3的切割酶ADAM10以活性依赖性方式从神经元释放，是介导NLGN3脱落的主要酶知识点：Cre(Cyclization Recombination Enzyme），即环化重组酶：是来源于噬菌体的一种酶蛋白，它可以