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课件:主要组织相容性抗原.ppt
(二)?? PCR-SSO分型法 用人工合成的HLA型别特异的寡核苷酸序列作为探针,与待测细胞经PCR扩增的HLA基因片段杂交,从而确定HLA型别。 PCR技术可将HLA复合体上指定基因片段特异性地扩增5~6个数量级;而专门设计的序列特异的寡核苷酸探针(sequence-specific oligonucleotide probe,SSOP )又能探测出等位基因间1~2个核苷酸的差异,故PCR-SSO技术具有灵敏度高、特异性强、所需样本量少等优点。 (三)?? PCR与SSP分型法 目前常规的HLA-DNA分型技术,包括上述的PCR-RFLP、PCR-SSO等,最终均需用标记的特异性探针与扩增产物进行杂交,再分析结果。 PCR与SSP分型法乃设计出一整套等位基因组序列特异性引物(sequence specific primer, SSP),借助PCR技术获得HLA型别特异的扩增产物,可通过电泳法直接分析带型并决定HLA型别,从而大大简化了实验步骤。 (四) PCR-SSCP技术 即PCR与单链构象多态性(single strand conformation polymorphism,SSCP)分析相结合的方法。 原理:单链DNA可形成稳定的构象,在非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳中其迁移率不仅受链的大小,而且受链的核苷酸顺序的影响。由于使用相同引物扩增产物长度一致,因而单链DNA在电泳中的迁移格局反映了单链核苷酸组成的不同,可十分敏感地检测等位基因间DNA顺序的微小差别,目前此技术已应用于DP等位点的分型。 此外,目前已建立的HLA基因分型技术还包括PCR异源二聚体电泳多态即PCR指纹图分析。 尽管采用DNA水平的HLA分型工作有了很大进展,但血清学分型, 特别对Ⅰ类基因产物仍是分型基础。 HTC与PLT对HLA-D和HLA-DP特异性检测由于方法较为复杂,耗时费力,且影响因素多,精确程度有限,已逐渐被众多DNA水平定型方法所取代。 DNA分型技术的应用,使HLA型别分析达到了更精细的水平,并因此发现了更多的HLA多态性。 小 结 名词解释:MHC复合体 MHC的遗传学特征 掌握I/II类MHC分子的结构、功能和分布 掌握MHC的生物学功能 自 测 题 1.MHC 2.HLA HLA复合体是的______MHC,位于_____染色体。 2.经典HLAⅠ类基因包括位点____ 、_____、 _____。 MHC是指染色体上编码主要组织相容性抗原的一组紧密连锁的基因群。( ) 1.以下哪一项关于MHC的说法是不正确的: A. 又称为主要组织相容性复合体 B. 它是编码主要组织相容性抗原的基因群 C. 其编码分子与移植排斥有关 D. 它与免疫应答的关系不大 E. 其编码分子参与细胞间相互识别 2.以下关于HLA复合体的说法哪项是正确的: A.它是人类第17号染色体上一组密连锁基因群 B.它编码的抗原能引起快而强的移植排斥反应 C.它是人类的白细胞抗原系统 D.它是编码次要组织相容性抗原系统的基因 E.它位于所有有核细胞表面 3.HLA复合体位于: A.第7号染色体 B.第17号染色体 C.第16号染色体 D.第6号染色体 E.第12号染色体 4.MHC分子参与下列哪些细胞的分化过程? A.造血干细胞分化为淋巴干细胞 B.淋巴细胞分化为前T淋巴细胞 C.前T淋巴细胞分化为成熟T淋巴细胞 D.成熟T淋巴细胞分化为记忆T淋巴细胞 E.淋巴干细胞分化为B细胞 5.编码β-2微球蛋白的基因位于人类: A.第6号染色体 B.第15号染色体 C.第7号染色体 D.第16号染色体 E.第17号染色体 6.HLAⅠ类抗原与抗原肽结合区位于: A.α1和α3结构域 B.α2和α3结构域 C.α1和β1结构域 D.α2和β2结构域 E.α1和α2结构域 7. MHC分子与抗原肽结合的部位在: A.多肽性区 B.非多肽性区 C.跨膜区 D.胞浆区 E.胞膜外区 资料可以编辑修改使用 学习愉快! 课件仅供参考哦, 实际情况要实际分析哈! 感谢您的观看 * 伊红——死细胞体积稍大,呈暗红色;活细胞有立体感,呈亮滴状 * 荧光染料——死细胞呈红色;活细胞呈绿色 * MHC-I类分子结构 α链:44KDa β链:12KDa 其基因位于15号染色体 一、HLA分子的结构
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