课件：老年黄斑变性的基因研究进展.ppt

7.黄斑变性易感基因2(ARMS2／LOC387715)位于常染色体10(10q26)，ARMS2负责编码位于视网膜线粒体中的蛋白的表达，该基因上的氨基酸序列 Ala69Ser也与 AMD 的发生发展有关。 8.研究发现一个参与人体免疫反应的关键分子 TLR3 的分子可被周围出现的病毒 RNA 激活，与 AMD 发生有关。可以成为基因治疗的靶点。 四、AMD的基因研究模型 研究证明 AMD 的病理过程涉及氧化应激、免疫炎症反应以及脂质和碳水化合物的代谢等。在分子遗传学以及分子流行病学的基础上，目前已选出多个 AMD 相关候选基因，多种 AMD 相关候选基因修饰的 AMD 小鼠模型相继建立。 1.单核细胞趋化蛋白-1（Ccl-2）或其受体（Ccr-2）敲除小鼠模型 巨噬细胞是清除补体及免疫复合物的主要细胞，其功能的缺失有利于补体和免疫复合物的堆积，这可能间接促进了 AMD 的形成。Ccl-2 对单核细胞具有趋化活性，可激活单核细胞和巨噬细胞，并调控单核细胞和巨噬细胞的黏附分子和细胞因子的表达。 在 Ccl-2 及 Ccr-2 敲除小鼠的体内均发现了类似人类 AMD 的病理改变，包括 RPE 内脂褐素的沉积、玻璃膜疣的产生和光感受器细胞的萎缩。此类小鼠的存活率以及成模率不甚理想。 2.趋化因子受体 1 抗体基因敲除（Cx3crl -/-）小鼠模型 12 月龄 Cx3crl -/-小鼠眼底可观察到光感受器层明显变薄，黄色结节样类玻璃膜疣沉积物。 在视网膜内，小胶质细胞（MCs）是 Cx3crl 的唯一寄存细胞，该模型可用于 MCs 与 AMD 病理机制的相关性研究。 3.单核细胞趋化蛋白-1（Ccl-2） ／ 趋化因子受体 Cx3crl 双基因敲除小鼠模型 6 周龄的小鼠模型可观察到类玻璃膜疣的视网膜改变，并随着年龄的增长变大融合，一些会形成疤痕样萎缩灶；同时该模型还会出现 RPE 细胞异常和光感受器细胞的萎缩。该模型小鼠优点是出现 AMD 病理改变要早于其他 AMD 模型小鼠，然而此模型造模技术要求高。 4.载脂蛋白 Bl00（ApoBl00）转基因小鼠模型 ApoBl00 是肝脏合成和分泌甘油三酯的VLDL 所必须的载脂蛋白，此基因的突变可引起多种脂蛋白的代谢紊乱。12月龄的人ApoBl00 转基因小鼠体内观察到了Bruch 膜明显增厚及基底膜沉积物，RPE 细胞的空泡形成。 5.ApoE 基因缺失（ApoE-/-）小鼠模型 对 ApoE-/-小鼠进行高脂喂养 出现光感受器细胞和 RPE 层细胞萎缩、排列紊乱，Bruch 膜厚薄不均，胶原纤维分叉，分叉处可见玻璃膜疣。 其作为 AMD 动物模型的优点在于较符合 AMD 自然病程。缺点是此动物模型的成模率不高。 6.超氧化物歧化酶（SOD）基因修饰小鼠模型 SOD 是一类超氧自由基的消除剂，SOD-1 则 是其一种亚型，SOD-1 基因的缺失会增强氧化应激反应对视网膜的损伤。实验研究显示Sod-1 -/-小鼠体内可发现类玻璃膜疣的视网膜沉积物，部分小鼠可发生CNV。SOD基因修饰小鼠可用于氧化应激反应与 AMD 致病机制的研究。 7.血浆铜蓝蛋白（CP）/亚铁氧化酶（HP）双基因敲除小鼠模型 铁与氧化应激反应相关联，CP 是一种铁氧化酶，调节细胞中铁的输出。CP 和 HP 双基因敲除小鼠眼底观察到了与 AMD 类似的病理表现，包括 RPE 的肥大和色素减退，光感受器萎缩，视网膜下新生血管。但该模型小鼠存活率低。 8.补体因子 H（CFH）基因敲除小鼠模型 CFH -/-小鼠也发生了类 AMD 的视网膜病理改变。 包括 ERG 显示 a、b 振幅均降低，视网膜自发荧光的增强，视网膜下沉积物的增多，光感受 器 外 段的紊乱。 9.脑啡肽酶（NEP）基因敲除小鼠模型 Aβ 沉积于 AMD 患者眼内， 并与玻璃膜疣的形成相关，而 NEP 具有降解 Aβ 的作用。 NEP 基因敲除小鼠体内可发现 Aβ 沉积和VEGF 高表达，同时伴随色素上皮源性因子（PEDF）的低表达，符合氧化应激反应的表现。此外有视网膜下沉积以及 RPE 细胞的萎缩等类似早期 AMD 的病理改变。 尽管目前建立的 AMD 模型方法繁多，但由于AMD 涉及遗传及环境因素，还尚无一种模型可以完全再现人 AMD 的发展过程，因而有必要进一步研究, 以寻找更佳的AMD 模型。 五、与基因治疗相关的研究 基因治疗是一个很有前景的治疗方法，把目的基因导入人的细胞去修正原有基因缺陷或者合成新的物质达到治疗作用 。 1.以VEGFR1为靶点经化学修饰得到的siRNA可使上调的VEGF mRNA沉默，阻断VEGF的过度表达，从而抑