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第一章 血液样本采集和血涂片制备
考纲:
一、血液生理概要
二、采血方法
三、抗凝剂选择
四、血液涂片制备
五、血液细胞染色
六、方法学评价
七、质量控制
一、血液生理概要 1.血液组成 2.血液理化性质 ①血量:正常人血量约为(70±10)ml/kg体重,成人约4~5L,约占体重的6%~8%。小儿血量与体重之比略高于成人,男性比女性血量稍多,但女性妊娠期间血量可增加23%~25%。 颜色:血液的红色来自红细胞内血红蛋白。动脉血氧合血红蛋白含量较高,呈鲜红色;静脉血还原血红蛋白含量高,呈暗红色。严重贫血者血液红色变浅。严重一氧化碳中毒或氰化物中毒者血液呈樱红色。 ②酸碱度:pH 7.35~7.45。 比密和渗透量 ①血液比密:正常男性约为1.055~1.063,女性约为1.051~1.060,相对黏度为4~5;血浆比密约为1.025~1.030;血细胞比密约为1.090。血液比密与红细胞含量、红细胞内血红蛋白含量有关:血浆比密和血浆内蛋白浓度有关。 ②血浆渗透量:正常人约为290~310mOsm/(kg·H20)。 3.血液特性:悬浮稳定性、黏滞性(纤维蛋白原、球蛋白)、凝固性。 4.血液生理功能:具有运输功能、协调功能、维护机体内环境稳定和防御功能。 血液组成
血液标本类型 ① 全血 适用于临床血液学检查。 ② 血浆 全血+抗凝剂+离心 适用于内分泌激素、血栓与止血检查。 ③ 血清 全血+离心(静置) 适用于临床化学和免疫学检测。 不加抗凝剂,血清缺少某些凝血因子,如凝血因子Ⅰ(纤维蛋白原)、Ⅱ(凝血酶原)、Ⅴ、Ⅷ等。 血浆与血清的区别 血浆抗凝出凝血 血清清白缺因子
二、采血方法 (一)静脉采血法 1.概述 通常采用肘部静脉、手背静脉、内踝静脉或股静脉。小儿可采颈外静脉血液。为避免血小板激活,要使用塑料注射器和硅化处理后的试管或塑料试管。
2.操作方法和注意事项 准备→检查→选择→消毒→扎压脉带→穿刺→抽血→放血与混匀
(二)皮肤采血法(毛细血管采血法) 皮肤采血法曾称为毛细血管采血法,是采集微动脉、微静脉和毛细血管的混合血,同时含细胞间质和细胞内液。 采血针 1.概述 部位→手指(WHO推荐左手无名指指端内侧)和耳垂。 耳垂采血痛感较轻,操作方便,但血循环较差,受气温影响较大,检查结果不够恒定(如红细胞、白细胞、血红蛋白和血细胞比容等测定结果比手指血或静脉血高),一般情况下不宜使用。手指采血操作方便,检查结果比较恒定。
2.操作方法 (1)准备:取合适试管,加适量稀释液。取微量吸管和乳胶吸头相连,检查连接处是否漏气,或取一次性微量吸管备用。 (2)按摩:轻轻按摩左手中指或无名指指端内侧,使局部组织自然充血。 (3)消毒:用75%乙醇棉签擦拭采血部位,待干。 (4)针刺:用左手拇指和食指固定采血部位使皮肤和皮下组织绷紧,右手持一次性消毒采血针自指端腹内侧刺入,深度2~3mm,立即出针。 (5)拭血:待血液自然流出后,用无菌干棉球擦去第1滴血。 (6)吸血:用一次性微量吸管吸血,然后用无菌干棉球压住伤口止血。如血流不畅,可用左手自采血部位远端向指端稍施压使血液流出。 (7)稀释:用无菌干棉球擦净微量吸管外部,将吸管伸入装有稀释液的试管底部,慢慢排出吸管内的血液,并用上清液冲洗管内余血2~3次,最后将试管内的液体混匀。
3.注意事项 ●所选择采血部位无烧伤、冻疮、发绀、水肿或炎症等。 ●本试验具有创伤性,必须严格按无菌技术操作,防止采血部位感染,做到一人一针一管,避免交叉感染,最好用一次性器材。 ●皮肤消毒后,应待75%乙醇挥发后采血,否则流出的血液扩散而不成滴。 ●因第1滴血混有组织液,应擦去。如血流不畅切勿用力挤压,以免造成组织液混入,影响结果的准确性。 ●进行多项检查时,采血的顺序依次为血小板计数、红细胞计数、血红蛋白测定、白细胞计数等。
【口诀】 静脉肘部是首选, 放血别忘拔针头, 皮肤通常选手指, 婴儿趾或足跟, 多项检查小板先。
(三)真空采血法 真空采血装置有套筒式、头皮静脉式两种。真空定量采血容器,根据需要标有不同的色码,适于不同检验项目。
常用彩色真空采血容器的用途
盖子颜色
添加抗凝剂
注意事项
用途
红色
无
凝块形成约30min
化学、血清学、血库
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