课件：骨髓瘤细胞.ppt

* * * 杂种植株 融合的原生质体AB 再生出细胞壁 脱分化 愈伤组织 再分化 复习：植物体细胞杂交 植物细胞的融合 植物组织培养 植物细胞A 原生质体B 原生质体A 杂种细胞AB 去 壁 去 壁 人 工 诱 导 方法？ 促进融合的方法？ 融合完成的 标志 植物细胞B 酶解法（纤维素酶、果胶酶） 物理法：离心、振动、电激等 化学法：聚乙二醇（PEG） 原理 细胞膜的流动性和植物细胞的全能性 * 一、动物细胞融合 1、概念： 指___________动物细胞结合形成______细胞的过程。 2、结果： 形成单核的杂交细胞 3、原理： 细胞膜的流动性 4、过程： 5、意义：突破了__________方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。 6、应用：成为研究__________、细胞免疫、_____和生物新品种培育等的重要手段。特别是利用杂交瘤技术制造__________ 两个或多个 一个 有性杂交 细胞遗传 肿瘤 单克隆抗体 * 4、过程： 动物细胞A 动物细胞B 诱导，融合 2个完整的杂交细胞AB 有丝分裂 （膜融合、 诱导方法 质融合、 核融合） 单核细胞 * 2、什么是抗体？ 二、单克隆抗体 回顾 3、抗体的分布？ 抗体是机体受______刺激后产生的、并能与该抗原发生_____性结合的具有免疫功能的球蛋白。 主要分布在血清中。 1、什么是克隆？ “克隆”从英文“clone”音译而来，是指从一个共同祖先，通过无性繁殖的方法产生出来的一群遗传特性相同的DNA分子，细胞或个体。在细胞水平指动物细胞培养. 抗原 特异 * 该法制备抗体的特点： 产量低、纯度低， 且抗体的特异性差、灵敏度低。 阅读P52：抗体的传统生产方法及缺陷是什么？ 思 考：如何获取某种特定抗体？ * B淋巴细胞特点 ３．每一个B淋巴细胞只能产生一种抗体。 １．B淋巴细胞受抗原刺激后，可以 产生抗体。 ２．动物体内的B淋巴细胞可以产生百万种以上的抗体，每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。 * 二、单克隆抗体 由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体 称为单克隆抗体。 1、概念: * 怎样才能大量生产单克隆抗体？ 提示1：仅用细胞培养技术可行吗？ 提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？ 提示3：有什么方法能使B细胞产生抗体的能 力和肿瘤细胞无限增殖能力同时具备呢？ * 大量生产单克隆抗体思路 B淋巴细胞具产生抗体的功能 骨髓瘤细胞具无限增殖的特性 利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有淋巴细胞和骨髓瘤细胞特性的杂交瘤细胞 利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞 * B淋巴细胞 注射特定抗原蛋白 骨髓瘤细胞 培养骨髓瘤细胞 融合 （只考虑两两融合）培养液中细胞有几种类型？融合细胞几种类型？ 骨髓瘤细胞---骨髓瘤细胞 B淋巴细胞--- B淋巴细胞 B淋巴细胞---骨髓瘤细胞 多种杂交细胞 在具有筛选作用的培养基上培养 专一抗体检验阳性 克隆上述杂交细胞 分开不同杂交细胞，克隆专一抗体， 检验阳性细胞 单克隆抗体 注射到小鼠体内 体外培养 2、单克隆抗体的制备过程 第1次筛选目的：得到杂交瘤细胞（多种）。 第2次筛选目的：在杂交瘤细胞中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。 该细胞继承双亲细胞的遗传特性，既能产生专一抗体又能迅速大量繁殖。 杂交瘤细胞有何特点？ 特异性强，灵敏度高,并可大量制备 * 免疫小鼠 培养骨髓瘤细胞 融合 骨髓瘤细胞 B淋巴细胞 注射特定抗原蛋白 选择培养基上培养 专一抗体检验阳性 专一抗体检验阳性 注射到小鼠体内 体外培养 单克隆抗体 克隆杂交细胞 分开不同杂交细胞，克隆专一抗体，检验阳性细胞 多种杂交细胞 杂交瘤细胞有何特点？ 本过程利用的那些技术？ 动物细胞融合技术 动物细胞培养技术 是否注射抗原 （只考虑两两融合）培养液中细胞有几种类型？几种融合细胞？ 两次筛选的目的分别是什么？ 2、单克隆抗体制备过程 与传统制备的抗体相比具有什么特点？ * 3.单克隆抗体的应用： ①作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质并特异性结合 优点：准确、高效、简易、快速 ②用于 运载药物：制成“生物导弹” 治疗疾病：主要用于癌症治疗 　　资料：目前世界各国已经研制出数以百计的单克隆抗体。许多缺乏良好诊断手段的传染病、免疫性疾病、血液病、内分泌疾病和遗传病，用单克隆抗体作为诊断手段，是一个必然趋势。另外，用单克隆抗体做体内诊断，借以鉴别和定位体内“病灶”也引起人们的注意，目前，主要用于肿瘤追踪及