课件：实验十二金黄色葡萄球菌.ppt

典型菌落计数和确认 某一倍稀释度平板的菌落大于200 cfu且有典型菌落，且上一倍稀释度平板上有典型菌落，其平板上的菌落数不在20 cfu～200 cfu之间，计数该级稀释度平板上的典型菌落；以上按公式一计算。 平板菌落数均在20 cfu～200 cfu之间，按公式二计算。 从典型菌落中任选五个菌落（小于五个全选），分别接种到5mLBHI和营养琼脂小斜面，36℃±1℃培养18～24h。 典型菌落计数和确认 公式一：T=AB/Cd T----样品中金黄色葡萄球菌落数 A —某一稀释度典型菌落的总数 B —某一稀释度血浆凝固酶阳性的菌落数 d —某一稀释度 C —某一稀释度用于血浆凝固酶试验的菌落数 样品稀释度 10-1 10-2 典型菌落数 66，64 6，6 用于做血浆凝固酶的菌落数 5 5 血浆凝固酶阳性菌落数 4 4 T=AB/Cd T=65×4÷5÷0.1=520 典型菌落计数和确认 公式二 N=A1B1/C1+A2B2/C2/1.1d N—样品中金黄色葡萄球菌落数 A1-第一稀释度（低稀释倍数）典型菌落总数 A2--第二稀释度（高稀释倍数）典型菌落总数 B1--第一稀释度（低稀释倍数）血浆凝固酶阳性的菌落数 B2--第二稀释度（高稀释倍数）血浆凝固酶阳性的菌落数 C1--第一稀释度（低稀释倍数）用于血浆凝固酶试验的菌落数 C2--第二稀释度（高稀释倍数）用于血浆凝固酶试验的菌落数 d — 稀释因子（第一稀释度） 1.1—计算系数 样品稀释度 10-1 10-2 典型菌落数 150，160 18，16 用于做血浆凝固酶的菌落数 5 5 血浆凝固酶阳性菌落数 3 4 公式二 N=A1B1/C1+A2B2/C2/1.1d A1B1/C1=155×3÷5=93 A2B2/C2=17×4÷5=14 T=(93+14)/1.1d=127÷1.1÷0.1=970 结果报告 单位:cfu/g或cfu/mL 如T值为0，报告 ＜1× d cfu/mL（g）。  检样 检样25g(mL)+ 225ml灭菌生理盐水，均质。 10倍系列稀释 选择3个连续的适宜浓度的样品匀液，接种BP平板 计数及血浆凝固酶试验 报告  36±1℃ 18～24h 金黄色葡萄球菌MPN计数 样品稀释 接种和培养 根据对样品污染状况的估计，选择3个适宜稀释度 的样品匀液（液体样品可包括原液），在进行10倍递增稀释时，每个稀释度分别吸取1mL样品匀液接种到10%NaCl 胰蛋白胨大豆肉汤管，每个稀释度接种3管，将上述接种物36℃±1℃培养，45h～48h。。 用3mm接种环，从有细菌生长的各管中，移取1环，分别接种Baird－Parker平板，36℃±1℃培养，45～48h。 金黄色葡萄球菌MPN计数 典型菌落确认 从典型菌落中至少挑取1个可疑金黄色葡萄球菌菌落接种到BHI肉汤和营养琼脂小斜面，36℃±1℃培养18～24h。进行血浆凝固酶试验 结果计算： 计算血浆凝固酶试验阳性菌落对应的管数，查MPN检索表 结果报告 根据检索表的数值，报告样品中金黄色葡萄球菌的含量，单位:MPN/g或MPN /mL。 后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用 主要经营：网络软件设计、图文设计制作、发布广告等 公司秉着以优质的服务对待每一位客户，做到让客户满意！ 致力于数据挖掘，合同简历、论文写作、PPT设计、计划书、策划案、学习课件、各类模板等方方面面，打造全网一站式需求 * * * * * * * * * * * * * 实验十二 金黄色葡萄球菌检测 GB4789.10-2010 一、实验目的 学习了解金黄色葡萄球菌的生物学特性 学习掌握金黄色葡萄球菌的分离、鉴定方法及原理 二、实验原理 金黄色葡萄球菌属于微球菌科葡萄球菌属，可产生肠毒素，人误食了含有毒素的食品，就会发生食品中毒，因此，由该菌引起的中毒为毒素型食物中毒。 生化特性 典型的金葡菌呈球形，大小0.5×1.0μm。致病性菌较非致病性菌小。在液体培养基中生长，常呈双球菌或短链状排列。 本菌无鞭毛及芽孢，一般不形成荚膜。革兰氏染色阳性。 金葡菌耐盐性强，最适宜生长的盐浓度为5%～7.5%,可利用此特性对金葡菌增菌，抑制杂菌。 可产生溶血素，在血平板生生长菌落周围有透明溶血环。 可产生卵磷脂酶，分解卵磷脂，产生甘油脂和可溶性磷酸胆碱。 致病性金葡菌可产生血浆凝固酶。 金葡菌镜下特征 操作流程 检样25g(mL) +稀释液225mL，均质 血浆凝固酶试验 7.5%氯化钠肉汤或10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤） BHI肉汤和营养琼脂斜面 Baird-Parker平板，血平板 涂片染色 36℃±