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· 1298 · 中华实用儿科临床杂志2015年9月第30卷第 17期 ChinJApplClinPediatr,September2015,Vo1.30,No.17
增高。合并细菌感染时,白细胞和 中性粒细胞总数增 值,阴性结果不能完全除外流感,但要注意是否存在标
多 ,拍圳 。 本采集时问较晚(病程 1周)和标本质量有关。
3.2.2 病原学和血清学检查 流感的实验室诊断方法 3.2.3 病毒分离 有鸡胚和传代细胞培养2种流感病
主要包括病毒抗原检测、核酸检测、血清抗体检测和病 毒分离方法。该方法是流感病毒鉴定的金标准,但灵敏
毒分离与鉴定。病毒抗原和核酸检测用于病例的早期、 度相对其他检测方法低,而且受患儿病程影响较大,对
快速诊断,是临床上主要的流感实验室诊断方法;血清 实验室条件和实验人员的技术要求高,培养需要较长的
抗体检测主要用于回顾性诊断,当患儿恢复期血清较急 时间,因此临床上很少用于流感快速诊断 J。
性期血清特异性抗体滴度有4倍或4倍以上升高时具 结果判定:阳性结果具有诊断价值,阴性结果不能
有诊断价值;病毒分离是流感病例确诊的金标准。 除外流感。
3.2.2.1 病毒抗原检测 (快速诊断试剂检测) 3.2.4 血清学诊断 血清免疫学方法用于检测血清中
(1)直接免疫荧光法:是 目前临床上最为常用的快 的抗流感病毒抗体,其中最常用的方法为红细胞凝集抑
速诊断方法之一。该方法使用荧光素标记的抗流感病 制实验(hemagglutinationInhibition,HI),该方法简便、易
毒单克隆抗体检测呼吸道上皮细胞中的病毒抗原,大约 行、结果可信,但需要用受体破坏酶 (receptordestroying
2h就能判断结果。但该方法的检测结果受样本的质量 enzyme,RDE)对血清进行 16~18h处理。微量中和法
和处理过程影响较大,要求标本中有一定量的呼吸道上 (microneutralization,MN)是 目前WHO流感监测中推荐
皮细胞,否则会造成假阴性的结果。鼻咽吸出物标本优 使用的标准方法之一,尤其经过优化的MN方法,可以
于鼻咽拭子。 在24h内对病例血清中抗体进行检测。
(2)胶体金免疫层析法:该方法利用免疫层析的原 结果判定:血清学检测需要恢复期较急性期血清
理,通过抗原抗体结合,以胶体金为示踪物呈现颜色反 IgG抗体效价4倍或4倍以上增高才有诊断意义,单份
应,从而判断样本中是否存在检测的抗原或抗体。该检 血清 IgM阳性一般不能用作实验室确诊标准。
测方法具有特异性强、操作简单、重复性好、方便快捷 3.3 诊断标准
(一般能在 l0—30rain获得结果)且不需要特殊设备和 3.3.1 流感样病例 发热(腋下体温138℃),伴咳嗽
仪器等优点,因而非常适合临床早期诊断和出入境等机 或咽痛之一,缺乏实验室确定诊断为某种疾病 的依
构的现场筛查,但是其敏感性低于实时荧光定量聚合酶 据 J。
链反应(RealtimeRT.PCR) ,该检测方法的结果仅能 3.3.2 疑似流感病例 在流感流行季节,符合下列情
作为初步参考。 况之一者,考虑疑似流感病例。。。
(3)病毒抗原检测结果判定:阳性结果具有诊断价 (1)发热伴急性呼吸道症状和/或体征 (婴幼儿和
值,阴性结果不能完全除外流感,可能与标本采集时间 儿童可只出现发热,不伴其他症状和体征)。
较晚(病程 1周)和标本质量有关。 (2)发热伴基础肺疾病加重。
3.2.2.2 病毒核酸检测
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