实验七 逆境植物细胞膜的伤害(电导法).pptVIP

实验七 逆境对植物细胞膜透性的影响  (电导法) 原理： 植物细胞膜对维持细胞的微环境和正常的代谢起着重要的作用。在正常情况下，细胞膜对物质具有选择透性能力。 用电导仪测定可以比较植物组织中的外渗电解质的含量，从而间接了解细胞透性的大小。 材料与设备： 植物材料： 女贞叶片； ? 实验器具： 电导仪； 温箱；恒温水浴锅； 小烧杯，量筒  操作步骤： 选取低温(高温）处理的女贞叶片5片，先用纱布拭净，再用打孔器打取20片小圆叶，放入小烧杯中，加入20ml 蒸馏水作为处理组。再用相同的方法打取20片未经处理的小叶放入小烧杯中，加入20ml 蒸馏水作为对照组。  操作步骤： 2.将小烧杯放入35℃水浴锅中静置20min，期间用玻棒轻轻搅动叶片，到时间后用，电导仪测定溶液电导率。  将试验数据填入下表中并分析 实验八 萘乙酸对根和茎生长的作用 原理： 生长素对植物的不同器官有着不同的效应, 一般 来说，低浓度的生长素促进生长，高浓度时则抑制 生长。不同的植物器官对生长素的反应也不同，通 常根比芽、茎对生长素更敏感。 本实验据此观察不同浓度的萘乙酸在种子萌发过程 中对植物不同器官生长的影响。 1.植物材料： 萌动的绿豆种子， 2.实验器具： 温箱，培养皿，移液管，小镊子，标签纸，尺子 3.试 剂： 10mg/L萘乙酸； 操作步骤： 1. 取绿豆种子，用0.1%升汞消毒15min，再用自来水和蒸馏水各冲洗3次，置于22℃的温箱中催芽2d。 操作步骤： 2. 取9cm的洁净培养皿7套，编号 在1号培养皿中加入10mg/L 萘乙酸10mL，然后从其中吸取1mL放入2号培养皿中，加9mL蒸馏水混匀后即成为1 mg/L 萘乙酸溶液。 如此依次稀释到6号培养皿（最后从第6号培养皿中取出1mL弃去），则1号至6号培养皿中的萘乙酸浓度依次为10 mg/L、1 mg/L、0.1 mg/L、0.01 mg/L、0.001 mg/L、0.0001 mg/L。 第7号培养皿中则加入9mL蒸馏水作为对照。 操作步骤： 3.选取已萌动的绿豆种子6粒，用镊子将其整齐地排列在培养皿中，使胚的部位朝向同一侧，盖上皿盖后，放在25℃的温箱中培养3d。 记录数据并做统计分析 作业： 1.用数理统计的显著性检验法对所测的数据进行统计分析。 2.指出哪一个浓度最适宜于下胚轴的生长?哪一个浓度最适合根的生长? 说明各种浓度对根、茎生长的不同影响. * * 如高温或低温，干旱、盐渍、病原菌侵染后，细胞膜遭到破坏，膜透性增大，从而使细胞内的电解质外渗，以致植物细胞浸提液的电导率增大。膜透性增大的程度与逆境胁迫强度有关，也与植物抗逆性的强弱有关。 比较不同植物或同一植物不同品种在相同胁迫温度下膜透性的增大程度，即可比较植物间或品种间的抗逆性强弱。 因此，电导法目前已成为植物抗性栽培、育种上快速鉴定植物抗逆性强弱的一个精确而实用的方法。 电导仪的原理 电导率是物质传送电流的能力，是电阻率的倒数。在液体中常以电阻的倒数――电导来衡量其导电能力的大小。 电导率--电阻率的倒数即称之为电导率L。 电导L的计算式如下式所示： L=l/R=S/l 电导的单位用姆欧又称西门子。用S表示， 由于S单位太大。常采用毫西门子，微西门子单位1S=103mS=106μS。 一般用当量电导来表示电导率。电导率 L的单位是 (μS/cm) 电导仪的用法 3. 测过电导率之后，再放入100℃沸水浴中10min，以杀死植物组织，取出放入自来水冷却，测其煮沸电导率。 [ 注意事项 ] 1. 整个过程中，叶片接触的用具必须绝对洁净（全部器皿要洗净），也不要用手直接接触叶片，以免污染。 2. 测定后电极要清洗干净。 4．计算 按下式计算相对电导度： 相对电导度（L）= （S1-空白电导率）/（S2-空白电导率） S1:煮前的电导率 S2:煮后的电导率 空白电导率:蒸馏水的电导率 相对电导度的大小表示细胞膜受伤害的程度 由于室温对照也有少量电解质外渗，故可按下式计算由于低温或高温胁迫而产生的外渗，称为伤害度（或伤害性外渗）。 伤害度（%）= 式中 Lt—处理叶片的相对电导度； Lck—对照叶片的相对电导度。 1.比较不同处理的叶片细胞透性的变化情况，并加解释。 2.植物在逆境情况下细胞膜的透性会怎样变化？ 3.植物抗逆性与细胞膜透性有何关系 ? 作业： 煮后 煮前 煮后 煮前 对照 处理 伤害率 % 相对电导率 （%） 煮前的电导率/煮后的电导率×100 电导率（us/cm） 浸渍 时间（min）