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实验七 酵母菌形态观察与死活细胞鉴别
实验七 酵母菌的形态观察 与死活细胞鉴别 目的要求 1、观察酵母菌的形态及出芽生殖方式 2、学习区分酵母菌死活细胞的方法 实验原理 酵母菌是单细胞真核微生物，其大小为常见细菌的几倍至几十倍。大多数酵母采用出芽方式进行繁殖。 美蓝是一种弱氧化剂，其氧化态呈蓝色，还原态呈无色。用美蓝对酵母细胞进行染色时，由于新陈代谢，活细胞具有较强的还原能力，可使美蓝由蓝色的氧化型转变为无色的还原型，染色后细胞呈无色。死细胞或代谢能力弱的衰老细胞其还原能力弱，染色后细胞呈蓝色。 实验材料 1. 培养2d的面包酵母斜面培养物 2. 0.1%吕氏碱性美蓝染液 实验方法 1. 滴一滴吕氏碱性美蓝染液于载玻片中央，无菌操作取酵母培养物置于染液中，混合均匀。 2. 取盖玻片，将盖玻片一端与菌液接触，缓慢将盖玻片倾斜并盖在菌液上。 3min后，镜检。观察酵母菌形态及出芽情况，并根据细胞颜色区别死活细胞。 4. 30min后，再次观察。 美蓝染液水浸片法 实验报告 绘图说明面包酵母形态特征及出芽生殖情况 绘图说明曲霉和青霉的形态特征 第1组：牛肉膏蛋白胨琼脂培养基，1000ml，121℃灭菌20min，P241 第2组：伊红美蓝培养基（EMB培养基）：伊红美蓝琼脂22.5g, 水600ml, 121℃灭菌20min 20%乳糖水溶液120ml：24g加水120ml，115℃灭菌20min 第3组：3倍浓缩乳糖蛋白胨培养基100ml： 蛋白胨3g，氯化钠1.5g，水100ml 1.6%溴甲酚紫乙醇溶液0.5ml，每管加5ml，共15管,内装倒置小管，121℃灭菌20min。 第4-5组：普通浓度乳糖蛋白胨发酵培养基700ml：P244 蛋白胨7g，氯化钠3.5g，水700ml 1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1.2ml， 每管加7ml，共45管，内装倒置小管 每管加10ml，共35管，内装倒置小管，121℃灭菌20min。 第6组：固体淀粉培养基：600ml，P243 蛋白胨6g，氯化钠3g，牛肉膏3g，可溶性淀粉1.2g，水600ml，琼脂10g， 121℃灭菌20min。 第7组：明胶培养基，500ml，P243 蛋白胨5g，氯化钠2.5g，牛肉膏1.5g，明胶80g，水500ml，每管7ml， 121℃灭菌20min。 第8组：蛋白胨水培养基：250ml，p244 蛋白胨2.5g，氯化钠1.25g，水250ml，每管7ml， 121℃灭菌20min
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