蛋白质组学相关考题.pptVIP

1. 生物质谱所用的内肽酶是 。（北京大学2010试题；北京大学2009试题） A CPA B CPB C CPY D Trypsin 知识要点 （1）CPA，CPB，CPY是羧肽酶A、羧肽酶B、羧肽酶Y。羧肽酶（carboxypeptidase）是一类肽链外切酶，它能专一地从肽链的C-末端开始逐个降解，释放出游离氨基酸，用于C-末端氨基酸残基分析。 （2）Trypsin是胰蛋白酶，是最常用的蛋白水解酶，专一性强，只断裂赖氨酸或精氨酸的羧基参与形成的肽键。用固相法测序时，用胰蛋白酶裂解得到的肽段可以通过双功能交联剂—对苯二异硫氰酸直接偶联到固相载体上。 解题思路 多注意常用酶的英文及缩写根据知识要点1、2，排除A、B、C。 参考答案 D 2.简述2-3种检测蛋白质间相互作用的方法。 （北京大学2010试题；中国科学院2009试题） 知识要点 （1）蛋白质-蛋白质相互作用的研究已被纳入蛋白质组学的研究范畴。 （2）蛋白质相互作用的方法包括：酵母双杂交、Far Western印迹技术、GST融合蛋白质沉降技术、蛋白质芯片技术、等离子表面共振技术、免疫共沉淀技术和荧光共振能量转移法等。 解题思路 首先要了解蛋白质-蛋白质相互作用和蛋白质-DNA相互作用方法的区别，然后根据知识要点选取2-3种方法进行阐述。 参考答案 （1）酵母双杂交系统（yeast two-hybird system）：是利用杂交基因通过激活报道基因的表达探测蛋白-蛋白的相互作用。真核生物转录因子具有DNA结合结构域（BD）和转录激活结构域（AD）,这两个结构域分开时仍分别具有功能，但不能激活转录，只有它们以适当途径在空间上较为接近时，才能重新具有转录因子活性，并激活报道基因表达。 （2）免疫共沉淀（IP）：基本原理是抗原和抗体之间专一性地相互作用而沉淀，从而保留下来，其是一种经典的检测蛋白质相互作用的方法。其实验过程比较简单，裂解细胞后，加入抗体，抗原被沉淀下来后洗涤，去除非特异性结合，再分析复合体。抗体可以是单克隆，也可以使多克隆。 （3）蛋白质芯片（protein chip）：蛋白质芯片可以用来大规模筛选蛋白质之间的相互作用，将一个蛋白质芯片与荧光标记的探针蛋白孵育，洗脱非特异性结合的蛋白后，可以通过扫描芯片上的荧光点来检测稳定的相互作用蛋白点。 8. 研究蛋白质相互作用可以采用 、 、 等方法。（北京大学2008试题） 14. 蛋白质双向电泳（2-DE）是根据蛋白质分子量大小和 的不同来分离蛋白质的技术。（中山大学2007试题） 5. 蛋白质芯片技术基本上是基于（ ）方法中的原理。（深圳大学2009试题；中科院上海生命科学研究所2006试题） A Northern blot B Western blot C Southern blot D Eastern blot 10. 用来研究蛋白质-蛋白质间相互作用的实验技术是（ ）。（中国科学院2007试题） A 酵母双杂交技术 B 原位杂交技术 C RACE技术 D SAGE 技术 25. 免疫沉淀法（immunoprecipitation）一般用于分离（ ）。（中山大学2008试题） A DNA B RNA C 蛋白质 D 脂类 名词解释： 1. Edman降解(Edman degradation) （苏州大学2008试题； 浙江大学2004试题） 2. 等电聚焦（isoelectrofocusing，IEF/EF） （苏州大学2008试题；华南理工大学2005试题） 3. 蛋白质组学（proteomics） （深圳大学2010试题；武汉大学2003试题） 4. 蛋白质组（proteome） （深圳大学2010试题；协和医科大学2006试题；武汉大学2005试题） 5. 双向电泳（two-dimentionlal gel electrophoresis，2-DE） （四川大学2006试题；军事医学科学院2000试题） 6. 酵母双杂交系统（yeast two-hybird system）（浙江大学2007试题；协和医科大学2006试题） 7. SDS电泳（SDS） （中国农业大学2006试题；南开大学