一株拮抗病原真菌的固氮菌Paenibacillussp.GD812-中国农业科学院.PDF

中国农业科学 2011,44(16):3343-3350 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2011.16.006 一株拮抗病原真菌的固氮菌Paenibacillus sp. GD812 陈 倩，高 淼，胡海燕，徐 晶，周义清，孙建光 （中国农业科学院农业资源与农业区划研究所／农业部作物营养与施肥重点实验室，北京100081） 摘要：【目的】筛选具有拮抗病原真菌功能的固氮菌，研究菌株的固氮酶活性、nifH、生理生化特征、菌株 抗逆性与接种效果等，并对该菌株进行鉴定，为微生物肥料生产筛选菌种资源。【方法】采用无氮培养基富集、筛 选固氮菌，用对峙法筛选拮抗菌；乙炔还原法测定固氮酶活性，PCR扩增 16S rDNA和nifH；通过形态、生理生化 特征和16S rDNA序列分析鉴定菌种；采用温室盆栽小白菜试验接种效果。【结果】筛选到1 株固氮菌GD812，该菌 株固氮酶活性达到 30.661 nmol C H /h·mg蛋白，同时具有拮抗麦类赤霉病菌（Gibberella zeae）和棉花黄萎病 2 4 菌大丽轮枝菌（Verticillium dahliae）功能，抑菌率分别达到59.5%和49.3%；根据形态、生理生化特征和16S rDNA序列分析结果，GD812 被鉴定为类芽孢杆菌Paenibacillus sp.；该菌株的nifH基因长度 300 bp，与 Paenibacillus sp. Bs57 nifH基因序列相似性98%；GD812 可以利用35 种供试碳源中的20 种，耐酸碱pH4—11， 在 4—50℃均可生长，盆栽试验接种比对照小白菜鲜重增加52%。【结论】固氮菌GD812 被鉴定为类芽孢杆菌，该 菌株利用碳源广泛，抗逆性强，具有较高的固氮酶活性和拮抗病原真菌能力，盆栽试验显示较好的接种效果，可 望进一步研发成为优良的固氮微生物肥料生产菌种。 关键词：生物固氮；类芽孢杆菌；菌种筛选；微生物肥料 A Nitrogen-Fixing Bacterium Paenibacillus sp. GD812 Antagonistic Against Plant Pathogenic Fungi CHEN Qian, GAO Miao, HU Hai-yan, XU Jing, ZHOU Yi-qing, SUN Jian-guang (Institute of Agricultural Resources and Regional Planning, Chinese Academy of Agricultural Sciences/Key Laboratory of Crop Nutrition and Fertilization of Ministry of Agriculture, Beijing 100081) Abstract: 【Objective 】 The obj ective of this study is to screen nitrogen-fixing bacteria antagonistic against plant pathogenic fungi and research nitrogenase activity, nifH, physiological and biochemical characteristics, identification, stress resistance of the functional strains and inoculation effect on plant and to prepare strains for microbial fertilizer production. 【Method 】Nitrogen-free medium was used to isolate