课件：链球菌肠球菌.ppt

结果判断：在2-10min内发生胶乳凝集，为阳性。待检菌与哪群致敏胶乳凝集就表明该菌为相应血清群的链球菌。 Lancefield血清凝集分型 （7）胶乳凝集试验： 原理：抗链球菌溶血素“O”（ASO）高滴度的病人血清被适量的溶血素“O”中和后，失去了正常水平量的抗体，多余抗“O”抗体与ASO胶乳试剂反应，出现清晰、均匀的凝集颗粒。 方法：先将病人血清56℃30min灭活，然后用生理盐水做1：15稀释。在反应板个空内分别滴加稀释血清、阳性和阴性对照血清1滴（50ul），再于各孔内滴加1滴溶血素“O”溶液，轻摇1min混匀，最后在各孔内分别滴加1滴ASO胶乳试剂，轻摇3min后观察结果。 结果判断：出现凝集为阳性、不凝集为阴性。ASO阳性可认为患者近期受溶血性链球菌感染过，可辅助诊断风湿热、肾小球肾炎等疾病。 肠球菌属 步骤和方法 1、菌落观察: 将菌株接种于血琼脂平板上，35℃孵育18-24h后观察菌落，肠球菌在血琼脂平板上呈灰白色、不透明、表面光滑的小菌落，菌落周围可出现α溶血环，也可无溶血环。 2、形态观察 涂片、革兰氏染色镜检，记录镜下细菌染色性、大小、形态及排列。 肠球菌形态类似链球菌，为单个、成双或短链状排列的卵圆形革兰氏阳性球菌。 3、生化反应： （1）触酶试验：肠球菌属为阴性反应。 （2）胆汁-七叶苷试验： 原理：培养基的胆汁对某些细菌有抑制作用，只有既能在胆汁中生长，又能水解七叶苷的细菌才能表现出对七叶苷的水解活性。肠球菌能在胆汁中生长，并水解七叶苷，使培养基变黑。 方法：将被检菌1~3个菌落接种于胆汁-七叶苷琼脂培养基，35℃孵育18~24h。 结果：细菌生长，且培养基变黑色或棕褐色为阳性，不变色为阴性。肠球菌为阳性。 （3）65g/L NaCl生长试验： 原理：肠球菌有很强的耐盐能力，能在65g/L NaCl血清肉汤培养基中生长，而链球菌的耐盐能力较弱，在此培养基中不能生长。 方法：将待检菌接种65g/L NaCl血清肉汤中，35℃孵育18-24h。 结果：细菌生长且使得培养基变黄为阳性，不生长为阴性，肠球菌为阳性。 （3）PYR试验： 原理：多数肠球菌含有吡咯烷酮芳基酰胺酶，能水解吡咯烷酮-β-萘基酰胺（PYR），释放出β-萘基酰胺，与PYR试剂作用形成红色复合物。 方法：挑取被检菌落在含有PYR的纸片上涂擦， 35℃孵育5min，再于纸片上滴加PYR试剂，观察纸片颜色。 结果：约1min后纸片呈红色为阳性，不变色为阴性。肠球菌、A群链球菌和某些凝固酶阴性的葡萄球菌为阳性。 后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用 主要经营：网络软件设计、图文设计制作、发布广告等 公司秉着以优质的服务对待每一位客户，做到让客户满意！ 致力于数据挖掘，合同简历、论文写作、PPT设计、计划书、策划案、学习课件、各类模板等方方面面，打造全网一站式需求 后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用 主要经营：网络软件设计、图文设计制作、发布广告等 公司秉着以优质的服务对待每一位客户，做到让客户满意！ 致力于数据挖掘，合同简历、论文写作、PPT设计、计划书、策划案、学习课件、各类模板等方方面面，打造全网一站式需求 * * * * * * * * 实 验 五链球菌及肠球菌的鉴定 目的要求： 1.掌握链球菌属及肠球菌属的分离培养与鉴定方法。 2.掌握链球菌及链球菌的菌落特点、菌体形态及染色性。 步骤与方法 1、观察菌落 将菌株接种于血琼脂平板上，35℃孵育18-24h后观察菌落，记录菌落大小、形态、表面、边缘、透明及颜色、有无溶血及特点。将肺炎链球菌继续孵育2-3天看菌落中心有无凹陷呈“脐状”。 链球菌的溶血性 β溶血性链球菌 2、形态观察 涂片、革兰氏染色镜检，记录镜下细菌染色性、大小、形态、排列及荚膜。 肺炎链球菌 S. pneumoniae 形态与染色：G+球菌,矛头状 ,成双排列，宽端相对 ，尖端向外,有荚膜 肺炎链球菌革兰染色有荚膜 肺炎链球菌荚膜染色特点 肺炎链球菌 S. pneumoniae 培养特性：营养要求高，兼性厌氧。初次分离需提供5%-10%的CO2。 18-24h后血平板上形成灰白色、圆形、