课件：医学硕士答辩欧琴答辩.ppt

* 结 果 三、EBV LMP2 B细胞表位融合 蛋白免疫原性的初步研究 结 果 图13 不同免疫原在不同时间的抗体均值（X±SD） 分别包被3种表位融合蛋白ozlf-67、ozlf-69和ozlf-71，分别 检测3种表位融合蛋白的免疫血清与His蛋白免疫血清的抗体效 价差异。 结 果 图14 多肽表位诱导鼠免疫血清的抗体效价的ELISA检测结果 * * ：与His蛋白免疫组比较 * * 结 果 B95.8细胞作为包被抗原，ELISA检测3种表位融合 蛋白免疫小鼠制备的鼠血清抗体效价。 图15 B95.8细胞包被ELISA检测鼠免疫血清抗体效价 * ：与His蛋白免疫组比较 * * * 结 果 选用Ozlf-67融合蛋白为诊断抗原，ELISA检测NPC组、 CA疾病对照组及健康对照组血清特异性IgG抗体。 图16 ozlf-67蛋白包被ELISA检测病人血清抗体效价 * ：与正常组比较 * 结 果 分组 份数 A值 阳性 阴性 阳性率 NPC组 48 0.866 ±0.231 34 13 70.8％ CA组 68 0.140 ±0.106 4 64 5.9％ 正常组 68 0.184 ±0.067 0 68 0 表5 ozlf-67蛋白包被ELISA检测病人血清抗体阳性率 * *与正常组比较 * 分 析 与 讨 论 预测的B 细胞表位是线性B 细胞表位，主要 的参数有二级结构、跨膜区、亲水性、表面可及 性、抗原性以及柔韧性等，抗原性和亲水性是形 成表位的首要条件，因而优势表位的形成是多种 因素综合作用的结果。 分 析 与 讨 论 采用分子生物学方法分别得到了包含预测 表位片段的重组质粒，并得到了融合蛋白，为 进一步表位融合蛋白的免疫学检测奠定基础。 分 析 与 讨 论 3种表位融合蛋白均具有良好的免疫原性 B细胞表位多肽均能诱导产生特异性抗体 以B95.8细胞作为抗原包被酶标板， B细胞表位 融合蛋白诱导的小鼠免疫血清与EBV抗原特异 　性结合，但抗体效价较低，可能是由于单个表位 肽的结合能力较弱。 分 析 与 讨 论 选用Ozlf67融合蛋白为诊断抗原，ELISA检测NPC患者血清特异性抗体，用于NPC的血清学诊断试剂的研制具有临床应用价值。 结 论 1.预测EBV LMP2的B细胞表位可能位于其N端199～209、318～322和381～391区段； 2. 分别成功构建了含B细胞表位的重组质粒pET32a(+)/ozlf-67、pET32a(+)/ozlf-69和pET32a(+)/ozlf-71；在原核表达系统内分别高效表达了表位融合蛋白ozlf-67、ozlf-69、ozlf-71；通过亲和层析法得到了纯化的表位融合蛋白。 3. 表位融合蛋白免疫小鼠血清学检测，表明3个B细胞表位融合蛋白均能刺激机体产生抗体，具有较强的免疫原性，抗体效价随免疫次数增加而升高；表位融合蛋白诱导所产生的抗体均能与EBV抗原结合。 4.Ozlf67蛋白作为诊断抗原，具有较强的抗原性，用于NPC的血清学诊断试剂的研制具有临床应用价值。 首先我要衷心感谢我的导师张丽芳教授、夏克栋教 授三年来对我的悉心指教和无私关怀。本文是在导师的 悉心指导和严格要求下得以完成。在此向导师致以最诚 挚的敬意和感谢！ 感谢基础医学院微免教研室和基础医学院实验平台 全体老师给予的帮助和支持！感谢附一和附二检验科老 师给予实验的帮助！感谢师姐、师弟、师妹及我的同学 等对我实验的帮助及生活的关心！ 我要衷心感谢我的家人，他们的关心和鼓励给予我 强大的精神动力。他们为我所做的无私奉献将使我终生 感激！ 最后感谢评审委员和参与本人论文答辩的各位专家 教授在百忙之中对本文的指导！ 致 谢 后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用 主要经营：网络软件设计、图文设计制作、发布广告等 公司秉着以优质的服务对待每一位客户，做到让客户满意！ 致力于数据挖掘，合同简历、论文写作、PPT设计、计划书、策划