课件：郑大天然药化总论.ppt

（五）根据物质离解程度的不同进行分离 对于具有酸性、碱性或两性基团的分子 在水中多呈离解状态（正离子或负离子状态） 可采用离子交换法或电泳技术 （如高效毛细管电泳法）进行分离 离子交换树脂是以离子交换树脂为固定相 依据流动相中组分离子与平衡离子 进行可逆交换时的结合力大小的差别 而进行的一种层析方法 离子交换色谱法（IEC) 高分子聚合物基质： 苯乙烯通过二乙烯苯（DVB） 交联成的大分子网状结构 电荷基团： 与高分子共价结合形成 带电的可进行离子交换的基团 平衡离子： 结合于电荷基团上的相反离子 能与溶液中其他离子团可逆交换 平衡离子带正电的离子交换树脂能与带正电的离子基团发生交换，称阳离子交换树脂；平衡离子带负电的离子交换树脂能与带负电的离子基团发生交换，称阴离子交换树脂。 R-X-Y+ + A+ R-X-A+ + Y+ R-X+Y- + A- R-X+A- + Y- 阳离子交树脂：强酸性（－SO3-H+） 弱酸性（－COO-H+）。 阴离子交树脂：强碱性（－N(CH3)3Cl-） 弱碱性（－NH2）。 离子交换树脂的结构 分离原理： 以离子交换树脂为固定相，当流动相流过交换柱时，溶剂中的中心分子以及不发生交换的化合物将首先通过柱子流出，而被交换的离子被交换吸附到柱子上，利用不同的洗脱剂即可实现物质的分离。 离子交换树脂的使用 装柱与洗脱剂：湿法装柱上样（水或含水溶剂）。水或酸碱洗脱剂（如NaOH水溶液，HCl水溶液等），或酸碱缓冲液（如磷酸盐缓冲液、氨水缓冲液、吡啶缓冲液等）。 预处理 在水中溶胀，水悬浮去掉杂质；酸碱交换浸泡，水洗至中性， 再生处理 阳离子交换树脂：酸洗 碱洗 酸洗 阴离子交换树脂：碱洗 酸洗 碱洗 离子交换树脂的应用 用于不同电荷的分离：可以利用离子交换树脂将混合物分为中性化合物、酸性化合物、碱性化合物和两性化合物等几个部位。 用于相同电荷的分离：根据其酸碱性强弱的不同，在树脂上吸附程度的不同，选用适当的洗脱剂（或梯度洗脱）进行分离。分离电荷相同且离解程度相近的化合物，可选用200－400目的微粒固定相用。 薄层色谱在天然产物提取中的应用 指导提取工艺的选择 提取溶剂的选择 确定提取次数 萃取剂的选择 A 指导分离条件的选择 选择柱色谱条件 检查分离的效果 B 天然产物化学结构研究法 天然化合物的 结构确定是 新药研发基础 天然化合物 结构研究的 难度较大 结构研究是 天然药化的 重要研究内容 纯度鉴定 熔点测定法：纯净的化合物熔点敏锐。 TCL或PCL：需用三种展开系统证明均为一个斑点。 GC：适合于可以气化的样品。 HPLC：适合所有化合物。 GC和HPLC的优点突出，用量少、时间短、灵敏度高、准确度高。 鉴定天然产物化学成分的一般步骤 物理常数测定 熔点、比旋度 沸点、折光率比旋光度 结构式确定 平面结构 立体结构 分子骨架确定 不饱和度 物理常数 波谱性质 化学反应 分子式测定 元素定性定量分析 MS法求分子量 质谱（MS） 以某种方式使样品分子电离、裂解，然后按质荷比（m/z）大小把生成的各种离子分离，检测它们的强度，并按m/z的大小排列成谱。 可用于确定分子量及求算分子式。 提供其他结构信息，推测化合物结构。 鉴定是否为同一化合物。 紫外吸收光谱（UV） 用紫外光为光源（200～400nm），照射样品溶液，测量其吸收度，并用波长对吸收度或摩尔吸收系数作图而得的吸收光谱图。 分子结构中具有共轭双键、发色团和共轭体系的助色团的化合物在紫外光区产生紫外吸收光谱。 可根据紫外吸收光谱曲线最大吸收峰的位置基吸收峰的数目和摩尔吸收系数来确定化合物的基本母核，或是确定化合物部分结构。 可用于确定某样品是否已知化合物；确定未知不饱和化合物的结构骨架；异构体的确定。 红外吸收光谱 （IR） 采用2.5～15μm(4000～667cm-1)范围内的不同波长的光波为光源，依次照射样品，经自动描绘所得的吸收光谱曲线。 其横坐标是波数或波长，纵坐标是百分透光度。 应用红外光谱测定分子中的基团，是利用各基团的特征吸收峰所出现的波长、强度和形状来判断的。 核磁共振(NMR) 是有磁矩的原子核（如1H、13C），在磁场的作用下，以射频照射，产生能级跃迁而获得的共振信号。 1H NMR：提供分子中不同种类氢原子的情报：H的数目，不同环境下H的化学位移，偶合常数，从而分析H相邻基团的结构等。位移范围：0～20ppm。 13C NMR：碳谱的主要特点是化学位移范围宽达300ppm以上。 二者互为补充，提供化合物结构的许多重要的信