课件：血清蛋白质测定.ppt

（2）稀溶液中蛋白质浓度测定的经验公式：蛋白质的肽键在200—250nm有强的紫外吸收。其光吸收强度在一定范围与浓度成正比，其波长越短，光吸收越强。若选用215nm可减少干扰及光散射，用215nm和225nm光吸收差值与单一波长测定相比，可减少非蛋白质成分引起的误差，因此，对稀溶液中蛋白质浓度测定，可选用215nm和225nm光吸收差法。 常用下列经验公式：蛋白质浓度（mg/mL）=0.144（A215-A225） 7.折光测定法 溶解在溶液中的固体可增加溶液的光折射率，在固定波长和温度下，光折射率和血清中蛋白质含量成正比。 原理： 评价及应用： 优点：简便、快速，易掌握，重复性较好，适合临床急诊，体检筛查和胸腹水蛋白质测定。 缺点：准确性较差，易受高血脂症，高胆红素血症以及溶血等因素影响，会由于A/G比值变化而产生误差。 参考范围：成人60－80g/L 临床意义： 总蛋白升高： 总蛋白降低：①丢失过多 ②消耗增加 ③白蛋白合成减少 ④水肿 真性升高：MM、巨球蛋白血症、自身免疫性疾病等 假性升高：机体明显失水，总蛋白含量相对升高， A/G几乎不变 二、血清白蛋白测定 方法： 1.染料结合法( 推荐) 　2.盐析法 3.电泳法　　　　　　　4.免疫化学法 1.染料结合法( 推荐) 原理: 血清ALB可通过离子键或疏水键与包括染料在内的各种有机离子结合,而GLB很少结合外源性染料,可在不分离ALB与GLB的情况下直接测定ALB。 染料 BCG BCP 优点 缺点 易于和非人源性白蛋白结合 与白蛋白结合特异性较差 与非人源性白蛋白结合力弱 与白蛋白结合特异性好 在30秒内测可提高特异性 应用及评价: 严格控制反应时间的BCG法既适合手工也适合自动 化分析。临床上推荐使用。 原理: 盐析是由于加入大量的中性盐破坏了蛋白质的水化膜、中和其所带的电荷从而使蛋白质分子聚集而沉淀析出。 各种蛋白质的亲水性和带电荷不同，故盐析时所需盐浓度与pH不同。GLB在生理pH下带电荷及水化膜比ALB少，可被较低浓度中性盐沉淀。 2.盐析法 中性盐：硫酸铵、硫酸钠等 应用及评价: 操作繁琐， 不宜自动化，基本不用 后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用 主要经营：网络软件设计、图文设计制作、发布广告等 公司秉着以优质的服务对待每一位客户，做到让客户满意！ 致力于数据挖掘，合同简历、论文写作、PPT设计、计划书、策划案、学习课件、各类模板等方方面面，打造全网一站式需求 * 收一种蛋白质组成的波峰，由于均一蛋白质泳动时，大部分含量集中在区带中央，吸只有少量向前向后扩散。 由数种电泳相接近的蛋白质组成的波峰，是数种蛋白质波峰的综合，因此形成一个宽、顶平和峰低的波峰。 * * * * 第Ⅰ型： β和γ区带连成一片，难于分开，称为β-γ桥。此型除见于极少数结缔组织疾病外，几乎全见于肝硬化，如见到β-γ桥，并伴有α1和α2球蛋白减少时可确诊为肝硬化，故将此型称为肝硬化型。 第Ⅱ型： 有β-γ桥存在，但在β与γ区带之间仍可见一浅谷，两者可分开，称为不完全性β-γ桥，但仅据此尚不能诊断为肝硬化，仅能作出提示诊断，故将此型称为提示肝硬化型。 第Ⅲ型： 为非特异型，β与γ区带能明显分离，没有形成β-γ桥，与其它原因所致的高γ球蛋白血症完全不能区别。 病理分析: β-γ桥的出现与血清免疫球 蛋白,特别是IgG、IgA、IgM同时 增加有关,其中又以IgA影响较大, IgA IgM泳动在β2与γ之间时,使 β与γ区融合而形成β-γ桥。 原发性肝癌型 主要特征： 白蛋白和α1球蛋白之间有一小的甲胎蛋白带。 ↓↓ AFP ↑ ↑ （4）M蛋白血症 M蛋白血症：浆细胞病时，异常浆细胞克隆增 殖,产生大量单克隆免疫球蛋白或其轻链或重链片段，病人血清或尿液中可出现结构单一的M蛋白。 三种类型： 免疫球蛋白型：IgE、IgA、IgM或IgD的一种 轻链型：由于K或λ轻链合成超过重链，而游 离于血清 重链型：浆细胞只产生免疫球蛋白的重链或有缺陷的重链 主要特征：在电泳图形上，出现异常浓 集色泽深染的窄区带，此区带多出 现在β或γ区，偶见于α区。用光 密度计扫描，可见到尖锐的高峰。 （其宽窄是与ALB