2015版本药典微生物限度计数之.酵母菌与霉菌.pdfVIP

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2019-10-22 发布于广东
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2015版本药典微生物限度计数之.酵母菌与霉菌.pdf

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霉菌与酵母菌计数方法 1试验菌液的制备和使用（以白色念珠菌为示例） 0 白色念珠菌（）代 ↓ 传代培养 ↓ 实验菌液的制备：沙氏葡萄糖琼脂培养基或沙氏葡萄糖液体培养 20 25 2 3 基，培养温度～ ℃，培养时间～天 ↓ 30 35 计数培养基适用性检查：胰酪大豆胨琼脂培养基，培养温度～ ℃ 5 100cfu 培养时间不超过天，接种量不大于 ↓ 计数方法适用性试验：胰酪大豆胨琼脂培养基（MPN 法不适用），培养温 30 35 5 100cfu 度～ ℃，培养时间不超过天，接种量不大于注：当需用玫瑰红钠琼脂培养基测定霉菌和酵母菌总数时，应进行培养基适用性检查检查方法同沙氏葡萄糖琼脂培养基 1.1菌种 5 试验用菌株的传代次数不得超过代（从菌种保藏中心获得的干燥菌 0 种为第代）并采用适宜的菌种保藏技术进行保存以保证试验菌株的生物学特性。 1.2 1 菌液制备（按表规定程序培养各试验菌株）取白色念珠菌的新鲜培养物 ↓ 用pH7.0 无菌氯化钠蛋白胨缓冲液或- 0.9%无菌氯化钠溶液制成适宜浓度的菌悬液取黑曲霉的新鲜培养物 ↓ 3 5ml 0.05 80 pH7.0 - 0.9% 加入～含％聚山梨酯的无菌氯化钠蛋白胨缓冲液或无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱 ↓ 采用适宜的方法吸出孢子悬液至无菌试管内 ↓ 0.05 80 pH7.0 - 0.9% 用含％聚山梨酯的无菌氯化钠蛋白胨缓冲液或无菌氯化钠溶液制成适宜浓度的黑曲霉孢子悬液 2 2 8 24 菌液制备后若在室温下放置，应在小时内使用；若保存在～ ℃，可在 2 8 小时内使用。稳定的黑曲霉孢子悬液可保存在～ ℃，