移液器的使用校准及日常维护..ppt

移液器（加样枪）使用、校准及日常维护 * 河北医科大学新药安全评价研究中心 王勇 1，移液器的基础知识 2，移液器的使用方法 3，移液器的使用注意事项 4，移液器快速校准的方法 5，移液器的日常维护保养 内容简介 移液器的基础知识 吸头 套筒 容量显示窗 吸头脱卸按钮 体积调节旋钮 移液器的基本结构 排气式移液器是指移液器活塞与吸入液体上表面之间有空气柱，在操作中，被移取的液体与活塞体之间因为空气柱的存在，将无法直接接触； 容积式移液器是指移液器活塞与吸入液体上表面之间没有空气柱，在操作中，被移取的液体与活塞体之间因为没有空气柱的存在，将可以直接接触。 移液器的基本分类 标称容量：在给定的有效量程范围内最大的容量 例如标称容量为100μl的可调式移液器，其有效量程是10μl-100μl，但实际上，其最小值可调节到7μl左右，最大值可调节到110μl左右，但这个范围7μl-110μl并不是厂家所宣称的量程，也不是该移液器的有效量程。 移液器的容量识别 移液器的使用 正向吸液：吸液时，将移液器按钮按到第一档吸液，释放按钮。放液时，先按到第一档，打出大部分液体，再按下第二档， 将余液排出。 移液器的移液方式 反向吸液：适用于粘稠液体和易挥发液体。吸液时将按钮直接按到第二档再释放，这样会多吸入一些液体，打出液体时只要按到第一档即可。此时，吸头内部还有多余液体，可以补偿吸头内部的表面吸附。 移液器的移液方式 1 选择量程合适的移液器 移液器只能在特定量程范围内准确移取液体，如超出最低或最大量程，会损坏移液器并导致计量不准； 2 设定容量值 2.1 粗调：通过调节旋钮将容量值迅速调整至接近自己的预想值； 2.2 细调：当容量值接近设定值以后，应将移液器刻度显示窗平行放至自己的眼前，通过调节旋钮慢慢地将容量值调至预想值，从而避免视觉误差所造成的影响； 2.3 设定容量值时的注意事项：在调节量程时，如果要从大体积调为小体积，则按照正常的调节方法，旋转旋钮即可。但如果要从小体积调为大体积时，则应先旋转刻度旋钮至超过量程的刻度，再回调至设定体积，这样可以保证量取的最高精确度。 移液器的操作方法 3 吸液嘴（吸头）的装配：把白套筒顶端插入吸液嘴，在轻轻用力下压的同时，把手中的移液器按逆时针方向旋转至吸液嘴卡紧。切记用力不能过猛，更不能采取剁吸头的方法来进行安装。吸液嘴卡紧的标志是略为超过O型环，并可以看到连接部分形成清晰的密封圈； 4 预洗吸液嘴：在安装了新的吸液嘴或增大了容量值以后，应该把需要转移的液体吸取、排放两到三次，确保移液工作的精度和准度； 移液器的操作方法 5 吸液：先将四指并拢握住移液器上部，用拇指按住塞杆顶端的按钮，向下按到第一停点，再将吸头垂直浸入液面2~3mm，缓慢平稳松开按钮，吸上液体，并停留1～2秒钟（粘性大的溶液可加长停留时间）； 移液器的操作方法 6 移液：缓慢抬起移液器取出吸液嘴，确保吸液嘴外壁无残留液体。可用定性滤纸抹去吸嘴外面可能黏附的液滴。小心勿触及吸液嘴口； 7 目测吸入的液体体积是否合理； 8 放液：将吸液嘴贴到容器内壁并保持20°-40°倾斜，平稳地把按钮压到第一停点，停1-2s（粘性大的液体要加长停留时间）后，继续按压到第二停点，排出残余液体。松开按钮，然后将吸液嘴沿着内壁向上移开； 9 按吸头弹射器除去吸头，吸取不同样本液体时必须更换吸头； 移液器的操作方法 1 正确填充吸头 当某一吸头的建议（标称）范围为最大吸头容量（标称容量）的 10% 至 100% 时，可在 35% 至 100% 这一较小以及优化的范围内实现最高精确度。 在此范围内移液会减少对操作人员技法的要求，并可将结果准确度提高。 当达到标称容量的 50% 时可提供最佳结果。 2 吸液时保持垂直入液角 使入液角尽可能地接近垂直位置，否则垂直液柱较小，这样将会吸入过多样品。 分液时，吸头应当与容器壁保持较小角度，从而确保良好的排液效果。 3 分液技法 对于大多数应用而言，建议在分液时将吸头的末端贴靠容器壁。这可减少或者消除分液后残留在吸头上的样品。沿侧壁向上滑动吸头末端将移液器撤下，从而去除吸头孔处的任何残留液滴。 移液器的使用注意事项 4 吸头入液深度 正确的吸头入液深度对于微量移液器尤为重要。如果吸头入液过深，则随着压力的加大，吸液量将会增多。保留在吸头表面的液体会影响结果。如果吸头入液太浅，则会造成空气进入，从而产生气泡以及导致容量不准确。正确的入液深度可使准确度提高达 5%。 移液器容量 入液深度 2 与 10ul 1mm 20 与 100ul