中药制剂检测新技术.ppt

山茱萸、六味地黄丸样品和对照品的电泳图谱 山茱萸（A）、六味地黄丸（B）和对照品（C）的电泳图谱 (1.肉桂酸；2.没食子酸） （五）方法学考察 线性范围 精密量取没食子酸对照品溶液0.1ml、0.2ml、0.4ml、0.6mL、0.8ml、1.0ml、2.0ml于5ml量瓶中，各加入肉桂酸内标液1mL，95%乙醇定容至刻度，以没食子酸对照品峰面积与内标物峰面积的比值对其质量浓度作图，其线性回归方程为Y=0.0167X+0.1333，相关系数r=0.9993（n=7）。 精密度 山茱萸和六味地黄丸峰面积的RSD分别为2.9%和2.1%（n=5） 准确度 山茱萸和六味地黄丸加样回收率分别为97.4%~98.6%和99.3%~102.4%。 （六）样品中没食子酸的含量测定 取山茱萸供试品溶液和六味地黄丸供试品溶液分别测定，山茱萸中没食子酸含量为0.225%；六味地黄丸中没食子酸的含量为0.055%。 中药指纹图谱（fingerprints of Traditional Chinese Medicine）是指中药材、饮片及其制剂经适当处理后，采用一定的分析方法与技术所精力的能够标识其化学特征的色谱图或光谱图。 特点：中药指纹图谱是一种综合的，可量化的 检验技术，它是建立在中药化学成分系统研究 的基础上，主要用于评价中药及其制剂质量的 真实性、优良性和稳定性。“整体性”和“模 糊性”为其显著特点。 一、指纹图谱的分类 （一）按研究与应用对象分类 中药材指纹图谱 中药原料（包括饮片、中药提取物）指纹图谱 中间体（工艺生产过程中的中间产物）指纹图谱以及中药制剂指纹图谱。 （二）按研究方法、手段分类 中药化学指纹图谱 中药生物学指纹图谱 二、中药指纹图谱建立的原则和研究思路 （一）中药指纹图谱建立的原则 中药指纹图谱的建立，应以系统的化学成分研究和药理学研究为依托，体现系统性、特征性和稳定性三个基本原则。 　1．系统性 是指指纹图谱中反映的化学成分应包括该中药有效部位所含大部分成分，或指标性成分的全部，如中药两头尖中抗肿瘤的有效成分为皂苷类化合物，则其指纹图谱应尽可能地反映其中的皂苷类成分；银杏叶的有效成分是黄酮类和银杏内酯类，则其指纹图谱可采用两种方法，针对这两类成分分别分析，达到系统全面的目的。 　2．特征性 是指指纹图谱中反映的化学信息（如保留时间）应具有较强的选择性，这些信息的综合结果，将能特征性地区分中药的真伪与优劣，成为中药自身的“化学条码”。 3．稳定性 是指所建立的指纹图谱在规定的方法、条件下的耐用程度，即不同操作者、不同实验室所重复做出的指纹图谱应在所允许的误差范围内，以体现其通用性和实用性。因而要求包括样品制备、分析方法、实验过程、数据采集、处理、分析等全过程都要规范化操作，同时，还应建立相应的评价机构，对其进行客观评价。 （二）中药指纹图谱研究思路 中药指纹图谱构建的一般程序包括：设计方案、样品采集、方法建立、数据分析、样品评价、方法检验和建立标准指纹图谱及其技术参数。 中药指纹图谱构建思路示意图 中药指纹图谱的建立可针对不同用途，选用不同的分析方法。如对于药品进行质量控制，应考虑生产企业和药检部门常规配备的仪器，方法耐用，一般以光谱法、气相色谱法和高效液相法为主。若用于配伍理论或新药研究，特别是化学成分与药理、药效相关性研究，可考虑联用技术。方法检验室是在方法确立后的一段时间内对更多未知样品进行检验分析，进一步考察方法的可行性和耐用性。 天然药物指纹图谱技术是世界范围内被广泛认可的质量控制手段。英国草药典(1996)、印度草药典(1998)、加拿大药用及芳香植物学会、德国药用植物学会、WHO草药评价指南(1996)、美国草药典(1999~2001,Monographs)均接受色谱指纹图谱。美国食品和药品管理局(FDA)于2000年8月发布的“植物药产品行业指南(征求意见草案)”中,指出特定植物药品种用色谱指纹图谱来进行质量控制是可以接受的。我国食品药品监督管理局(SFDA)于2000年发布了“中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行)”,首次以中药指纹图谱作为中药质量标准的一个新概念列入了药品管理法规。 知识链接 三、中药色谱指纹图谱建立的方法与技术要求 (一)样品的收集 为了确保指纹图谱的系统性，必须广泛收集具有代表性的样品。 一般要求不少于10批样品的收集数量（药材的批次是指不同产地、不同渠道或不同时间获取的独立样品，与成品的批次不同，要注意区分），每批供试品中取样量应不少于三次检验量，同时要有详实记录。 原药材尽可能固定产地(来自GAP基地药材或地