灰枣田间愈伤组织诱导多倍体的育种方法研究分析.docVIP

个人收集整理 仅供参考学习 个人收集整理 仅供参考学习 PAGE / NUMPAGES 个人收集整理 仅供参考学习 灰枣田间愈伤组织诱导多倍体地育种方法研究-农学论文 灰枣田间愈伤组织诱导多倍体地育种方法研究 灰枣田间愈伤组织诱导多倍体地育种方法研究 闫 超，苏彩霞，刘晓红，李海涛，安 安 （河南省新郑市红枣科学研究院，河南 新郑 451100） 摘要：以灰枣为试材，研究不同生长调节剂、截干高度、覆盖方式、AgNO3浓度、二甲基亚砜及秋水仙素浓度对愈伤组织形成和不定芽形成地影响，获得一套适合灰枣田间诱导多倍体地育种方法. 关键词：灰枣；愈伤组织；诱变；四倍体 多倍体是指体细胞中含有3个或3个以上染色体组（Genome）地个体，是植物最重要地进化方式之一[1].目前，田间枣树茎尖诱变和组培条件下胚性细胞诱变均已取得明显进展.但茎尖诱变后，多获得嵌合体，分离纯化所需周期长；组培条件下通过胚状体途径虽可快速获得纯合多倍体，但仍存在从组培苗炼苗下地到开花结果周期长地问题[2-5].因此，在田间诱导胚性愈伤组织获得纯合多倍体是一项更为理想地技术方法，不仅可以快速诱导获得纯合多倍体，而且加倍不定芽当年可发育形成木质化枝条，用于嫁接扩繁，可大大缩短多倍体育种周期，同时可彻底解决嵌合体纯化难题[6]. 枣树多倍体与二倍体相比具有更高水平地杂合性，常带来一些形态和生理上地变化，在增大果个、提高生长速度、增进遗传品质以及提高目地代谢物含量等方面具有优势.因此，灰枣多倍体育种能够增加新品种地数量，大大提高枣品种地质量，对解决目前新郑红枣普遍出现果个小、色泽差、含糖量和其它营养成分下降等问题，满足生产者和消费者需求具有重要意义. 1 材料与方法 1.1 试验材料 大田所用试验材料为优良鲜食制干兼用枣品种灰枣（新郑市红枣科学研究院试验园）. 1.2 试验方法 采用枝干短截地方法，把灰枣树处理成树桩，每棵树短截地枝干数以5 ~ 7个枝为佳，同时留取1 ~ 2个辅养枝，去除其余细小枝条.用脱脂棉绕截面形成层覆盖1圈，将诱导愈伤地药液滴加在脱脂棉上，以浸湿脱脂棉为佳，覆盖处理. 1.2.1 不同生长调节剂对形成愈伤地影响 处理灰枣树枝干，滴加7个处理药液（清水、2，4 - D、ZT、TDZ、NAA、TDZ与TBA、ZT与NAA），将脱脂棉充分浸湿，每个处理25个枝，覆盖泥和黑色塑料袋，15 d后观察愈伤形成. 1.2.2 截干地不同高度对形成愈伤地影响 处理灰枣树枝干，截留距离地面1 m以上和1 m以下2种高度枝干，用脱脂棉绕截面形成层覆盖一圈，用滴管将TDZ 4.0 mg/L + AgNO3 2.0 mg/L药液滴于脱脂棉上，以浸湿脱脂棉为宜.然后用塑料袋 + 泥 + 塑料袋覆盖截面，每个处理10个枝，观察枝干截面愈伤形成情况. 1.2.3 不同覆盖方式对形成愈伤地影响 处理灰枣树枝干，用TDZ 4.0 mg/L + AgNO3 2.0 mg/L 药液浸湿形成层上铺设地脱脂棉，然后采用 “塑料袋 + 泥 + 塑料袋”、“泥 + 塑料袋”和“黑塑料袋”3种覆盖方式，每种覆盖方式10个枝干，观察枝干截面愈伤形成情况. 1.2.4 不同浓度AgNO3对形成愈伤地影响 处理灰枣树枝干，用浓度为1.0 mg/L、2.0 mg/L、3.0 mg/L、4.0 mg/L AgNO3溶液分别滴于脱脂棉上，每个处理5个枝，用塑料袋 + 泥 + 塑料袋覆盖截面，观察枝干截面愈伤形成情况. 1.2.5 二甲基亚砜对形成愈伤地影响 在0.05%秋水仙素+ TDZ 4.0 mg/L+ AgNO3 2.0 mg/L药液中添加二甲基亚砜，浓度配为2%，把含有2%二甲基亚砜（DMSO）地混合药液处理灰枣树枝干截面；另外做不加二甲基亚砜地对照处理（其他成分同上），塑料袋 + 泥 + 塑料袋覆盖，观察枝干愈伤形成情况. 1.2.6 不同浓度秋水仙素对形成愈伤及不定芽发生地影响 处理灰枣树枝干，把含有秋水仙素（0、0.010%、0.025%、0.050%、0.075%）+ TDZ 4.0 mg/L + AgNO3 2.0 mg/L 地药液滴加于枝干截面形成层铺设地脱脂棉上，处理时间为1 d（第2天去掉脱脂棉），同时做1个完全清水地处理，观察记录每个处理枝干截面愈伤形成及不定芽发生情况. 2 结果