几种白菜类蔬菜卡那霉素抗性的研究.PDF

武汉植物学研究 2006，24(4)：377—380 Journalof Wuhan BotanicalResearch 几种 白菜类蔬菜卡那霉素抗性的研究 王峰 ，卢永恩 ，李汉霞 (1．华中农业大学园艺林学学院，武汉 430070；2．暨南大学药学院，广州 510632) 摘 要 ：标记基因的利用是筛选和鉴定基因转化的细胞、组织和转基因植株的有效方法。针对 目前遗传转化中常 用的卡那霉素 (Km)抗性基因，对几种 白菜类蔬菜的卡那霉素抗性作了较系统的探索，发现5．0ms／LKm可完全抑 制大白菜、小白菜及菜心子叶的再生；幼苗Krn抗性测验表明各品种均表现出随着Km浓度的提高，子叶黄化率升 高、根茎变短、鲜重减轻的趋势。白菜类蔬菜的卡那霉素抗性检测为遗传转化和阳性后代筛选奠定了基础。 关键词：白菜类蔬菜；卡那霉素 (Km)；敏感性；选择标记 ；转基因 中图分类号：$634 文献标识码 ：A 文章编号 ：1000-470X(2006)04-0377-04 KanamycinResistanceofSeveralVegetableBrassicas WANG Feng一，LU Yong—En 。LIHan—Xia ’ (1．CoaegeofHorticultureandForestrySc~ng：es，HuazhongAgrictdturalUnivers ，Wuhan430070，China； 2．Ji’aanUniversityCollegeofPharmacy，Guangzhon 510632，China) Abstract：Theuseofmarkergeneisanefficientmethodtoselectandidentifyrtansgeniccell，tissuesand plna tlets．Inthelightofkanamycinresistancegenewidelyusedinplnatgenetictrna sformation，asyste— matic investigationhtatcontributestogeneticrtansfomr ationonresistanceofseveralvegetablebrassicasis madeinhtisexperiment．Thetestsshowedhtat5mg／Lkanamycincouldcompletelyinhibitregeneration ofcotyledonofvegetablebrassicas．Kanamycinresistanceassayofseedlingssuggestedhtetendencyhtat cotyledonyellow ratesincrease，rootandstem lengthdecrease，andfreshweighdecreasewiht htelevelof kanamycinimproved．Thisprovidedabaseforgeneticrtna sfomr ationofvegetablebrassicasandscreening oftheiroffspring． Keywords：Vegetablebrassicas；Kanamycin；Sensitivity；Selectionmarker；Transgene 白菜类蔬菜包括大 白菜 (BrassicacampestrisL． 通常这种选择系统是通过导人一个抗生素、药物或 ssp．pekinensis)、小 白菜 (B．caml~strisL．ssp．chinen— 除草剂抗性的选择标记基因来实现。在选择压力 s)和菜心 (B．campestrisL．ssp．chinensisvar．paa— 下，未转化细胞受到抑制不能生长、发育，转化细胞 chinensis)，均为十字花科 (Cruciferae)芸薹属 (Bras— 被赋 予抗 性 能 正 常 生 长、发 育，并 分 化 成 植 sica)A基因组作物。结球大白菜在各类蔬菜中栽培 株[】]。目前在植物的转化