临床生化检验方法的选择与评价.ppt

齐齐哈尔医学院生化教研室 临床生化检验方法的选择和评价 临床生化检验方法的选择和评价，是临床生化检验质量控制的重要基础工作。当建立一个新的方法，或引进新的方法、都应对它们的技术性能作出评价，以便科学的选择和应用。 一 检验方法和标准品的分级 （一）方法的分级 临床生化检验方法根据其准确度与精密度的不同可以分为决定性方法、参考方法、常规方法等三级。 1．决定性方法（definitive method） 是指准确度最高，系统误差最小，经过详细的研究，没有发现产生误差的原因或在某些方面不够明确的方法。用于发展及评价参考方法和一级标准品。 2．参考方法（reference method） 是指准确度与精密度已经充分证实的分析方法，干扰因素少，系统误差与重复测定的随机误差相比可以忽略不计，有适当的灵敏度、特异性及较宽的分析范围。这类方法在条件许可的实验室中应经常使用。用于评价常规方法和试剂盒，鉴定二级标准品。 3．常规方法（routine method） 指性能指标符合临床或其他目的的需要，有足够的精密度、准确度、特异性和适当的分析范围，而且经济实用。这类方法经有关学术组织认可后可称为推荐方法（recommended method），推荐方法应具有足够的实验证据 三级方法的相互关系 （二）标准品的分级 国际标准化委员会将标准品（参考物）的定义为：一类具有一种或多种成分、且含量均匀确定的物质。 ；被用于校正仪器或用于评价一种测定方法的物质，并将其分成三级。 （二）标准品的分级 1．一级标准品（原级参考物，primary reference material ） 是一种稳定而均一的物质，它的数值已由决定性方法确定，或由高度准确的若干方法确定，所含杂质也已经定量，且有证书；用于校正决定性方法，评价及校正参考方法以及为二级标准品定值。 2．二级标准品（次级参考物， secondary reference material ） 包括用于常规分析的标准液。这类标准品可由实验室自已配制或为商品，它的示值必须用一级标准品和参考方法并由训练有素的，能熟练掌握参考方法的操作者确定；主要用于常规方法的评价或为控制物定值和常规测定的结果计算。 3．校准品（calibrator） 用二级标准品和常规方法测定得到校准品，用于常规测定中的标准 4 .控制物（control material） 具有与检测过程相适应的特性，其成分及基质与检测样本相同或相似，且均匀、稳定。 用于质量控制，控制患者样本的测定误差 各级实验方法与参考物的相互关系 二 常规方法选择的原则 （一）适用性 微量快速 方法简便 安全可靠 成本低廉 （二）可靠性 较高精密度、准确度 较好检测范围 （二）方法选择的步骤 （一）提出要求 （二）获取资料 （三）选定候选方法 （四）候选方法的初步试验 标准曲线的线性范围和重复性； 重复试验——精密度； 对比试验——准确度； 第二节 临床生化检验方法学评价 方法学评价（evaluation of methodology）通过实验途径测定分析方法的技术性能，并评价其是否能接受。评价实验的过程就是对误差的测定。 主要的方法技术性能指标：准确度(accuracy) 灵敏度(sensitivity) 特异度(specificity)分析测量范围(analytical measure range, AMR)评价实验的过程就是对误差的测定。 误差类型示意图 一、方法评价方案 （一）精密度评价1．目的要求 反映精密度好坏的指标是变异系数CV，CV越小精密度越好，反之则差，故有人称其为不精密度。 变异系数CV包括：批内、批间、日间和总CV，其中总CV最重要，它代表整个分析体系的可重复程度。 2．评价前的准备 ①对于评价对象和评价方案均应熟悉。 ②实验试剂应是同批次配制，或同一批号的商品试剂盒和参考物，仪器也应处于良好的工作状态 ③实验用标本一般选择2个（亦可更多），一个在正常范围或在医学决定水平附近，另一个为异常值，实验标本的介质应与临床标本一致。 ④先作一个初步的批内精密度测定，即一个标本重复测定20次，计算出均值，标准差和变异系数 3．评价步骤 用2个标本每天测定2次（2次测定间隔不得少于2小时），每次测定均作双份，共测定20天。每次测定至少做一个质控。 （二）准确度评价 1．方法比较试验 将试验方法（待评价或待验证的方法）与比较方法（参考方法或准确度已知的方法）进行比较，用于评价试验方法的恒定和比例系统误差。 （二）准确度评价 1．方法比较试验 (1)要求 比较方法应是参考方法或推荐方法，如该测定没有参考方法或推荐方法亦可用公认的常规方法。 但须具备： ①比较试验方法有更好的精密度。 ②干扰影响已知。 ③