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实验一 果蝇的生活史及遗传性状的观察 一、实验目的 1.掌握果蝇常见突变类型和性别的鉴定方法; 2.了解果蝇的生活史和饲养。 坚持 二、实验原理: 果蝇(Drosophila )属于昆虫纲,双翅目。 特点:生活史短,易饲养,繁殖快,染色体少,突变型多,个体小。 坚持 生活史:(最适温度20~25℃) 坚持 ♀ ♂ 大小 大 小 腹端 腹部末端稍尖 腹部末端呈钝圆形 腹片 6个腹片 4个腹片 背纹 腹部末端色浅,腹部背 面呈5条黑色条纹 腹部末端黑色,腹背3条条 纹,最后一条极宽,并延 伸到腹面,呈一明显黑斑 性梳 无 第一对足跗节基部有性梳 生殖器 外生殖器较简单,有阴道板和肛上板等结构 外生殖器较复杂,有生殖弧、肛上板、阴茎等结构 雌雄果蝇的辨别要点: 坚持 坚持 性梳 坚持 坚持 雌果蝇6节腹片,腹部底部为产卵管,呈现圆锥状凸出 雄果蝇4节腹片,腹部底部为交尾器,呈现黑色圆形外观。 坚持 果蝇的野生型性状: 红眼:眼睛颜色为砖红色,饱满圆形 灰体:体色灰黄 长翅:翅膀圆卵,静止时交叉重叠,约为腹部长度的两倍 直刚毛:头胸部以及复眼的周围具有平直、先端略弯的长型粗黑硬毛 坚持 常见突变性状: 坚持 突变型:黑檀体(e) 坚持 坚持 坚持 突变型:卷刚毛(sn3) 坚持 实验二~实验五果蝇的系列杂交实验 掌握果蝇的基本实验操作 掌握果蝇杂交实验的原理 坚持 果蝇的麻醉 转入麻醉瓶:轻拍培养瓶,震落果蝇,将麻醉瓶和培养瓶两口相对,将果蝇引入麻醉瓶。 麻醉:在麻醉瓶的棉花塞里侧加1~2滴乙醚,麻醉几分钟,直至果蝇不动为止。 观察:将果蝇倒在白瓷板上,用毛笔小心拨动观察。 补救麻醉:如果蝇在观察中苏醒过来,可用一平皿, 内贴一带乙醚的滤纸条,罩住果蝇进行麻醉补救; 坚持 适度麻醉 过度麻醉 坚持 处女蝇的收集 处女蝇:果蝇羽化后12h开始交配,之前不具生殖能力的雌果蝇,称为处女蝇。因雌果蝇能贮存精子,品系间杂交必须用处女蝇。 选择收集:将培养瓶内羽化的果蝇全部处死,此后8-12h内收集的羽化雌蝇,即是处女蝇。 坚持 果蝇计数 取一白纸,沿对角线对折然后展平,平置于桌面,将麻醉之果蝇倒于对角线折痕上,以毛笔拨弄果蝇使其均匀分散于对角线折痕上,然后沿对角线将雌雄果蝇分类拨入各侧计数。 坚持 杂交试验基本步骤: 1、收集处女蝇:每组做正、反交各1瓶,将母本旧瓶中的果蝇全部麻醉处死,在8-12h内收集处女蝇5只,和5只父本雄蝇转移到新的培养瓶中,贴好标签,于25℃培养。 2、7d后,F1幼虫出现,处死杂交亲本。 3、再过4-5天,F1成蝇出现。在处死亲本7天后,集中观察记录F1表型和性状;选取5对F1代果蝇,转入一新培养瓶,于25℃培养,贴好标签; 4、7d后,处死F1亲本; 5、再过5-7d,F2成蝇出现,开始观察记录,连续统计7d。 坚持 1、果蝇的单因子实验杂交组合 18#♀ x 2 #♂ (正交) 2#♀ x 18#♂ (反交) 2、果蝇的伴性遗传杂交组合 18#♀ x 22#♂ (正交) 22#♀ x 18#♂ (反交) 3、果蝇二对因子自由组合实验的杂交组合 e♀ x 2#♂ (正交) 2#♀ x e#♂ (反交) 果蝇的系列杂交实验 坚持 果蝇的三点测交 野生型果蝇(+++)为父本(红眼、长翅、直刚毛) 三隐性果蝇(wmsn3)母本(白眼、小翅、焦刚毛 ) (不要求作正、反交对照) 要求每组至少统计250只果蝇。故在“F1代果蝇,转入一新培养瓶”时,每组做4瓶或以上。 坚持
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