鸡马立克氏病流行与防控.ppt

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. 背景: 反转录病毒—REV在疱疹病毒MDV基因组中的插入 重组基础 混合感染现象---商业鸡群---多致瘤病毒共感染 共同的宿主---淋巴细胞和相同的微环境, MDV-感染B和T淋巴细胞,转化T;ALV引起骨髓细胞转化 MDV和ALV都在成纤维细胞中复制,ALV胸腺,法氏囊中复制;REV,淋巴细胞或网状内皮细胞,成纤维细胞中复制 反转录病毒为了自身复制,可以整合到任何双链DNA中(宿主、MDV、HVT、禽痘病毒) 细胞中相同的复制位置 REV在MDV基因组中的插入验证 Hot-Spot PCR(REV和MDV上下游交叉引物检测,病毒重组的验证) MDV pBAC-C全基因组序列 C? 全长 TRL UL IRL IRS US TRS REV LTR 大小(bp) 177811 12913 113542 12913 12941 10350 12346 533(2) 位置 1-177811? 964- 13876 13877- 127418 127419- 140331 141210- 154150 154151- 164500 164501- 176846 153096-152564 165795-165263 IRs区插入的相对位置(MDV Md5) LTR MDV086 (细胞质蛋白) MDV085 (预测蛋白) MDV083 (反义RNA蛋白) MDV084 (ICP4) MDV087 (MDV1 S2 ) MDV088 (ICP22) MDV089 (Us10 ) IRs区 TRs区插入的相对位置(MDV Md5) LTR MDV097 (MDV1 S2 ) MDV096 (gE ) MDV095 (gI ) MDV098 (细胞质蛋白) MDV099 (预测蛋白 ) MDV101 (反义RNA蛋白) MDV100 (ICP4 ) TRs区 插入重组的意义: 反转录病毒是混乱宿主和疱疹病毒遗传物质的元件之一。 这种重组可能改变MDV的组织趋向性、传播方式、致病性、疫苗保护性---MDV的进化? MDV meq序列-88株, 测定序列-63株 (2006-2013) 参考序列-25株 (中国分离毒株-11株,国外毒株-14株) 我们测的63株中除了3株位于弱毒分支外,其他的60株位于一个独立进化分支(不同于国外的毒株)。 MDV meq 我国MDV流行毒株处于一个独立的进化分支 A: MDV毒株的长重复区遗传进化树 B:MDV毒株的短重复区遗传进化树 15株MDV(全基因组)分子进化 MD的防控 防止雏鸡MDV野毒早期感染 控制混感---重组、加重MD? 免疫特点---非清除性抗肿瘤免疫、占位干扰作用---超感染和超感染抑制?---控制传播 疫苗---毒株?---感染程度? 免疫剂量 二次免疫 控制污染源 - 抗病力 - 免疫 MD疫苗株的应用 Four generations of MD Vaccines: 致弱的血清1型毒株(1970) HVT (1970s) 双价苗HVT+ SB1 (1983) CVI988 (Rispens株) (1990s),“814”株 我国MD疫苗使用情况 曾经使用的疫苗: HVT、CVI988、“814”、HVT+SB1、HVT+Z4、HVT+SB1+“814”、 CVI988+ HVT 当前主要使用的疫苗: 种鸡、蛋鸡-CVI988、“814”、HVT、CVI988+ HVT 肉鸡-主要为HVT HVT-IBDV-VP2---“立克法”“威力克” 814弱毒疫苗种毒株的建立 策略:自然弱毒中筛选、建立---弱毒疫苗种毒株 优点---安全性好、稳定性好和免疫效力好。 黑龙江省牡丹江(白洛克和来航)---多年没有发生MD --毒株培育:K株---DEF、CES;---“814” S株---DEF、QEF --毒株血清型和致病性:血清1型,自然弱毒株 安全性:(1)接种鸡12个月-(2)回归易感鸡10代 免疫原性:实验室免疫攻毒(J-1株) K株的KC25和45代(稳定性)--PI:88.9 传代特点: 1.KC50-非融合细胞---50-120代也很少见 2.病毒粒子的数量较多-几乎每个细胞都有病毒粒子

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