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快速微生物鉴定
传统方法与必威体育精装版技术
中国人民解放军总医院微生物科
沈定霞
CLSI M35-A2
主要的快速鉴定试验
斑点吲哚试验
PYR试验
斑点氧化酶试验
芽管试验
胆汁溶解试验
需氧菌的触酶试验
快速斑点CAMP试验
试管血浆凝固酶试验
2002 2008
保护工作人员,正确处理患者,防止病原菌扩
散
不用生化反应,商业设备,过夜培养
大肠埃希菌
初步:G-杆菌,非迁徙生长,在羊血平板(BAP)上
有β溶血环,或麦康凯或伊红美兰平板上分解乳糖,
斑点吲哚阳性,氧化酶阴性
明确:吡咯烷酮奈酰胺(PYR)试验阴性。如BAP平
板上无溶血环,乳糖阴性,应采用MUG试验,阳性
可鉴定为大肠埃希菌。
注意:
1. 如来自无菌部位应进一步鉴定以确定不发酵乳糖的大
肠埃希菌
2. 99%E.coli O157:H7 MUG阴性
铜绿假单胞菌
初步:革兰阴性杆菌,氧化酶阳性, 具有特殊
气味(醇香的葡萄味或玉米饼味)
明确:菌落有金属光泽或珍珠光泽,产色素,或
呈粘液型菌落,可鉴定为铜绿假单胞菌。
注意:
1.如无气味或色素,应在42 ℃生长
2.从囊性纤维化病人分离的铜绿假单胞菌形态不典型,有
时与洋葱伯克霍尔德菌菌落相似,应注意区分。
变形杆菌
初步:菌落迁徙生长,
吲哚实验:阴性奇异变形杆菌
阳性普通变形杆菌
确定:氨苄西林敏感,不需其它实验确定为奇异变形杆
菌。
注意:对氨苄青霉素耐药、吲哚阴性的变形杆菌要用麦
芽糖和鸟氨酸试验鉴定
菌种 麦芽糖 鸟氨酸
彭氏变形杆菌 + -
奇异变形杆菌 - +
流感嗜血杆菌
初步:革兰阴性小杆菌,在巧克力平板(不是血平
板)上于5%CO2 中35℃培养24h,生长的菌落直径
大于1mm;羊血平板上有卫星现象
确认:快速卟啉试验阴性可鉴定为流感嗜血杆菌。
卡他莫拉菌
初步:革兰阴性双球菌,氧化酶阳性,巧
克力平板和羊血平板上均生长,BAP上菌
落可移动
确认:快速丁酸酯酶试验阳性可鉴定卡他
莫拉菌。
注意:其它莫拉菌多数丁酸酯酶阳性,但
为球杆状,而非双球菌。
金黄色葡萄球菌
初步:革兰阳性球菌,葡萄串状排列,在血平板
上呈白色、黄色、奶油状不透明菌落,触酶阳
性,玻片凝集(+)
明确:4h快速试管凝集试验,乳胶凝集试验,或
快速耐热DNA酶试验(+)鉴定金黄色葡萄球菌。
注意:
1. 若分离自无菌部位,应进行试管法血浆凝固酶试
验,采用无菌EDTA兔血浆
2. 施氏和路登葡萄球菌可以玻片凝集+ (5% )
3. 腐生葡萄球菌可乳胶凝集试验+
凝固酶阴性葡萄球菌
初步:G+
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