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3.培养基中各种营养物质有什么作用?MS培养基的配方与微生物培养基的配方相比有哪些明显的不同? 培养基中各种营养物质的作用分别是:①微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐;②蔗糖提供碳源,同时能够维持细胞的渗透压;③甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。 微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同,MS培养基则需提供大量无机营养,无机盐混合物包括植物生长必需的大量元素和微量元素两大类。 4.为什么无菌技术是植物组织培养成功的关键? 植物组织培养不同于扦插、分根、叶插等常规无性繁殖。由于植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差,所以对培养条件的要求较高。用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长,如一些细菌、真菌等的生长。培养材料一旦被微生物(如细菌)污染,其分裂快、生长迅速,会争夺培养基中的营养,还会产生代谢废物毒害培养材料,导致实验失败。因此要进行严格的无菌操作。 5.将花药接种到MS培养基上之前,对消毒过的花蕾的处理应注意哪些? (1)在无菌条件下,除去萼片和花瓣。 (2)在剥离花药时,要尽量不损伤花药,否则接种后容易在受伤部位产生愈伤组织。 (3)要彻底除去花丝,因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。 6.实验操作中应注意哪些问题? (1)材料的选取:菊花的组织培养实验中,应选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝;月季花药的离体培养实验中,应选择花粉发育过程中的单核靠边期的花粉进行培养。 (2)外植体消毒:所用消毒剂为体积分数为70%的酒精和质量分数为0.1%的氯化汞溶液,所使用的清洗液是无菌水。 (3)培养过程:在初期,菊花的组织培养需光照,月季花药的培养不需要光照;而在后期均需要光照。 菊花的组织培养 植物组织培养所需营养的叙述,不正确的是( ) A.MS培养基既含硝态氮又含铵态氮 B.维生素以辅酶的形式参与生物催化剂酶系活动 C.植物生长调节物质包括生长素、细胞分裂素及赤霉素等 D.植物组织培养过程中无需从外部供糖 D 通常植物本身能进行光合作用,产生糖类,不需从外部供给糖。但植物组织培养过程中,离体组织或器官培养至愈伤组织的过程中,不能进行光合作用合成糖类,因此必须在培养基中添加糖,作为碳素来源和能量来源。 下列关于影响植物组织培养因素,说法正确的是( ) A.不同植物组织培养的难易程度不同,同一种植物材料培养的难易程度相同 B.在植物的组织培养中,培养基中必须添加植物激素 C.植物激素中生长素和细胞分裂素的作用是互相独立的 D.pH、温度、光照条件等对植物组织培养也特别重要 D 本题很易错选B项。在配制好的MS培养基中常常需要添加植物激素,而不是必须。比如菊花的茎段的组织培养比较容易,因此不必添加植物激素。 植物组织培养中,离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织,愈伤组织可再分化形成根、芽等器官。相关概念归纳如下: (1)脱分化:让已经分化的细胞,经过诱导后,失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程。即是由高度分化的植物器官、组织或细胞,产生愈伤组织的过程。 (2)愈伤组织:细胞排列疏松而无规则,是一种高度液泡化的呈无定形状态的、具分生能力的薄壁细胞。愈伤组织的细胞中不含有叶绿体。 (3)再分化:脱分化产生的愈伤组织继续进行培养,又可以重新分化成根或芽等器官的过程。 月季的花药培养 进行月季花粉培养时选择花粉的最佳时期为( ) A.盛开期的月季花 B.略微开放的月季花 C.完全未开放的花蕾 D.近凋谢时期的月季花 C 选择合适的花粉发育时期是提高诱导成功率的重要因素。花粉发育过程中,只有单核期核移向细胞一侧的时期(单核靠边期),花粉培养成功率最高,因此,通常选择完全未开放的花蕾。 关于花粉胚和愈伤组织的说法正确的是( ) A.花粉胚的细胞含有与体细胞相同的染色体 B.愈伤组织只能由体细胞培养产生 C.花粉胚具有直接发育成植株的能力 D.愈伤组织分化的花粉植物为二倍体 C A错误:花粉是有性生殖细胞,形成的花粉胚细胞中染色体数目与花粉粒中相同,为体细胞的一半。B错误:花粉植物的培育过程中,由花药中的花粉经脱分化也可形成愈伤组织。C正确、D错误:由单倍体性细胞产生的花粉胚也可发育成单倍体植株,但不能称二倍体。 植物组织培养技术与花药培养技术的异同 相同之处:培养基配制方法、无菌技术及接种操作等基本相同。 不同之处:花药培养的选材非常重要,需事先摸索时期适宜的花蕾;花药裂开后释放出
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