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克隆之多利羊 演讲:熊玉汶 制作:李泽原 克隆是英文clone或cloning的音译，而英文clone则起源于希腊文Klone，原意是指以幼苗或嫩枝插条，以无性繁殖或营养繁殖的方式培育植物，如扦插和嫁接。 一、多利羊风暴   1997．2．27  Nature （385：810－813）  英国爱丁堡罗斯林研究所  伊恩?威尔穆特小组：  1996. 7 多利羊出生 1996. 11 收到文章 1997. 2 文章发表 一条科学成就的宣布，在全世界范围内，在短短几十天左右时间，从学术界到经济界、政界引起巨大而深刻的反响，是空前的 。 “克隆”一词也顿时变得妇孺皆知。 克隆的过程 1 1.从一只6岁芬兰多塞特白面母绵羊 （姑且称为A）的乳腺中取出 乳腺细胞，将其放入低 浓度的营养培养液中， 细胞逐渐停止分裂， 此细胞称之为“供体细 胞”； 克隆的过程 2 从一头苏格兰黑面母绵羊（B） 的卵巢中取出未受精的卵细胞， 并立即将细胞核除去， 留下一个无核的卵细胞， 此细胞称之为“受体细胞”； 克隆羊的过程 3 3. 利用电脉冲方法，使供体细胞和受体细胞融合，最后形成“融合细胞”。 电脉冲可以产生类似于自然 受精过程中的一系列反应， 使融合细胞也能像受精卵 一样进行细胞分裂、分化， 从而形成“胚胎细胞”； 克隆的过程 4 4. 将胚胎细胞转移到另一只 苏格兰黑面母绵羊（C）的 子宫内，胚胎细 胞进一步分化和 发育，最后形成 小绵羊--多莉。 专业版实验过程 实 验 过 程 细胞融合 2、实验成功的关键，血清饥饿 ? 使细胞核和去核卵细胞处于细胞周  期中相匹配的阶段。 ? 使结合在基因（DNA）上的调控  蛋白脱落下来。 ? 重新编程（repreogram,remodel ） ?四、多利羊实验的理论意义和实  践意义 2、实践意义?? 蛋白质－多肽类药物 (胰岛素、凝血因子、干扰素、生长因子) 1998年产 76 亿美元 2000年产 185 亿美元 * 多利羊之父 威尔穆特 多 利 羊 成 为 明 星 多利和它的孩子 细胞核受体 Scottish Blackface ewe 细胞核供体 注射促性腺激素释放激素 经 28-33 h 排卵 Doll dorset BlackWlesh Finn Dorset ewe ewe Mountain 9天胚 26天胎羊 6岁母羊孕期 最后三个月 胚细胞 胎羊细胞 乳腺细胞 培养于0.5%胎牛血清培养基中， 使从生长周期中出来停顿于G0。 34~36 h 取出核 分别进行 培养在羊输卵管上 6 天，分裂成长至桑椹期或囊胚期 移入假母（苏格兰黑脸母羊）子宫, 1~3 胚/头假母 50~60天，超声检查，21头胎羊， 以后每 14天查一次。 最后产出八头小羊分属三个核供体来源。 ? 胎羊丢失率：62%（13头） ? 以形态特征，DNA microsatellite analysis ? 产出小羊均显示供体羊特征 ?1、理论意义 证实分化成熟的动物细胞核仍具全能性。 证实细胞质对胚胎发育分化的决定性。 *