上海市结核病实验诊操作规程.ppt

上海市结核病实验诊断操作规范 （适用于非定点综合性医院） 主要内容 结核病及其实验诊断的概述 结核病实验诊断的管理要求 结核病实验诊断的技术规范 附录 第一章 结核病及其实 验诊断的概述 结核病是一种严重危害人民健康的慢性传染病，目前全球有约20亿人被感染，每年新出现结核病患者约800-1000万，每年因结核病死亡人数约为200-300万。我国结核病患病人数居世界第二位，仅次于印度。我国结核病年发病人数约为130万，因结核病死亡人数每年达13万，超过其他传染病死亡人数的总和。结核病是我国重点防控的重大传染性疾病之一。 第一节 编写目的和应用范围 根据我国的结核病防控体系，结核病的诊治工作主要在定点医院内进行。 初次感染病人的症状往往不典型，存在轻症甚至无症状的结核病，老年人的结核病症状容易被其他疾病掩盖。这些病人的首诊医院往往不是定点医院。 非定点医院的实验室人员一般未经过结核分枝杆菌检验的正规培训和能力认可，操作规程、方法和检测的能力各不相同，容易导致不正确的检验结果，使结核病的漏诊、误诊率增加。 第二节 结核病基础知识 一、结核病定义和传播途径 结核病是由结核分枝杆菌复合群（Mycobacterium tuberculosis complex,简称结核分枝杆菌）引起的慢性感染性疾病，可累及全身多个器官系统，最常见的患病部位是肺脏。 传播途径主要是通过呼吸道传播。 个体吸入含有结核分枝杆菌的飞沫后是否患病取决于吸入结核分枝杆菌的数量、毒力和个体的抵抗力等多种因素。 二、结核分枝杆菌生物特性 结核分枝杆菌复合群包括结核分枝杆菌、牛分枝杆菌、非洲分枝杆菌和田鼠分枝杆菌，引起人类结核病的主要病原菌是结核分枝杆菌。 结核分枝杆菌大小为0.3-0.6?m×1-4?m，菌体细长而略弯，两端略钝。抗酸染色阳性是其重要特性。结核分枝杆菌生长缓慢，至少需要2-4周才出现可见菌落。 结核分枝杆菌细胞壁富含脂质，约占细胞壁的60%，主要的成分是分枝菌酸和酸化海藻糖。前者是抗酸染色反应的物质基础；后者包括海藻糖双分枝菌酸和硫甘酸，分别具有介导肉芽肿形成和保护细菌在吞噬细胞内存活的作用，被认为是结核分枝杆菌的毒力因素。 三、检测分枝杆菌的临床意义 临床检测分枝杆菌的最终目的是为了辅助分枝杆菌感染患者的诊断及治疗。 根据病人标本类型不同，所分离到分枝杆菌的临床意义也各不相同，实验室应尽快对病原菌做出鉴定，以确定其临床意义。 （一）非结核分枝杆菌 　　找到非结核分枝杆菌的临床意义取决于很多因素，包括： 临床环境和宿主状态 病原菌种类及其致病性 分离培养标本的来源及其被污染的可能性 被检出病原菌的数量（包括抗酸染色涂片） 阳性培养的次数 非结核分枝杆菌与临床疾病的关系 非结核分枝杆菌菌种 临床相关疾病 标本来源 脓肿分枝杆菌或鸟分枝 患有囊性纤维变性或 呼吸道 杆菌复合群（MAC） 支气管扩张的老年人 偶发分枝杆菌 食道贲门失弛缓症， 慢性 呼吸道 返流病，或矿物油摄入史 海分枝杆菌 有鱼缸或海水接触史的严重伤口 活检/抽吸物 堪萨斯分枝杆菌或MAC 毛细胞白血病，HIV感染史 血液，骨髓 龟分枝杆菌，脓肿分枝 慢性免疫抑制药（如类固醇激素） 杆菌或嗜血分枝杆菌 导致的浸润性皮肤损伤 活检/抽吸物 龟分枝杆菌，类龟分枝 中央静脉导管，假肢， 杆菌，偶发分枝杆菌或 创口，脓肿分枝杆菌 注射部位，局部创伤 活检/抽吸物 四、实验室检查 结核分支杆菌检查是确诊结核病最特异的方法。 （一）痰涂片 优点：操作简便，价格低廉，能快速检测出感染性肺结核。 缺点：直接涂片法灵敏度相对不高，要求每毫升痰标本中至少要包含5,000个杆状细菌才能检出阳性。肺外结核、HIV合并感染结核以及非结核分枝杆菌（NTM）感染的涂片灵敏度更低。 限制因素：抗酸杆菌（AFB）涂片镜检不能区分结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌（NTM），也不能区分死菌与活菌、耐药与敏感菌株。 （二）分枝杆菌培养 优点：分枝杆菌的分离培养和菌种鉴定能为结核病患者提供最终的诊断依据，与涂片相比可显著提高阳性检出率（通常提高30%-50%）。分离培养同时也为药物敏感性试验提供实验菌株。 缺点：操作更复杂，价格更昂贵，且菌体生长周期缓慢，并要求由专门的实验技术人员进行操作，用特殊的实验仪器进行培养，且所有实验必须保证在恰当的生物安全条件下才能开展。