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对乙酰氨基酚药效学评价 成都医学院 马松涛 对乙酰胺基酚解热作用评价 【实验目的】 掌握家兔内毒素发热模型的制备方法及药物解热作用的评价 实验原理 发热反应常常是由于各种致热因子（如内毒素、炎症因子等）作用于机体，产生和释放出内热原，进而影响下丘脑体温调节中枢，使机体体温调定点增高引起机体发热，体温升高。可用多种方法引起实验动物发热，如细菌或细菌产物、化学药物、刺激丘脑体温调节中枢及暴露于高热环境等。内毒素是最重要的致热原，致热原进入机体后，可激活单核巨噬细胞产生内生致热原(EP)，EP经血液进入大脑，于下丘脑前部引起体温调节中枢环核苷酸系统改变，前列腺素合成增加，体温调定点升高，机体产热增加，散热减少，引起发热。解热试验可作为评价和筛选解热药物的依据。 实验材料 实验动物：家兔3只，体重1.5～2.5 kg，雌雄均可。 实验器材：婴儿秤、注射器、体温计、凡士林或石蜡油、开口器、导尿管、烧杯。 药品与试剂：对乙酰氨基酚制剂、对乙酰氨基酚原料药、内毒素（大肠杆菌O111B4内毒素，最低发热剂量≤10 ng/kg）、蒸馏水、注射用生理盐水。 方法与步骤 1.实验前3 d开始每天测家兔肛温，测量方法为：将体温计涂上凡士林，使其润滑后插入家兔肛门约3～4 cm，放置3～5 min后取出读数，选择体温在38.5～39.5 ℃且体温波动在0.3 ℃以内的家兔供实验用。 2.内毒素溶液配制 取定量内毒素标准管1支，或用精密天平称取内毒素若干，用注射用生理盐水溶解稀释为10～100个最低发热剂量浓度，动物注射参考浓度为250 ng/(ml·kg) 方法与步骤 3.实验药品配制 用加热后的蒸馏水配制10%的对乙酰氨基酚溶液，对乙酰氨基酚制剂（仅限于普通剂型）也以加热后的蒸馏水配制成相当于含10%对乙酰氨基酚的溶液。 方法与步骤 4. 选取基础体温接近的3只家兔，实验当天再测一次体温，每只家兔均取3天所测体温的均值作为基础体温值，3只家兔分别经耳缘静脉注射大肠杆菌内毒素250 ng/kg(1ml/kg),注射0.5 h后，各组家兔给予处理前先记录1次体温，后分别给予处理，1号家兔按200 mg/kg灌胃给予对乙酰氨基酚制剂溶液，2号家兔按200 mg/kg剂量灌胃给予对乙酰氨基酚原料药，3号家兔灌胃等容量蒸馏水。给药后第30 min、60 min、90 min、120 min、150 min、180 min、210 min、240 min时记录家兔体温。 统计与处理 实验结束后，汇集全实验室的结果，计算各测定点家兔体温的变化△℃，以各测定点体温变化作方差检验。两两比较可用q检验或LSD检验。 注意事项 ⑴家兔所用体温计事先最好进行校正，各兔所用体温计最好能固定。 ⑵温度计插入肛门前，应先用手挤出肛门内的粪便，插入温度计时动作需轻柔，插入深度应一致，可用胶布与体温计上绕几圈作为插入深度的标记。测量过程中，体温上升不动时，可轻轻转动体温计改变体位，观察体温是否还会继续上升，但注意不要改变插入的深度，一般测体温时间需要再3 min以上。 注意事项 ⑶实验过程中避免家兔过度活动造成体温异常升高，影响实验结果的准确性。 ⑷如果实验所用对乙酰基酚制剂为缓控释制剂等特殊剂型，进入体内前，不能改变药物性状时，则只适宜选择大动物如家兔等进行实验，而不适宜选择小动物。 对乙酰氨基酚制剂的镇痛作用（小鼠扭体法） 实验目的 掌握经腹腔注射化学性刺激物质，引起小鼠扭体反应,评价和筛选镇痛药的方法。 实验原理 将一定容积和浓度的某种化学物质经腹腔注射小鼠后，刺激腹膜引起深部较大面积较长时间的炎性疼痛，致使小鼠出现腹部收缩内陷，躯干与后肢伸张，躯体扭曲等行为反应，称为“扭体反应”。该反应在注射化学刺激物后15 min内出现频率较高，因此，以注射后15 min内发生扭体反应次数或发生反应的鼠数为疼痛定量指标，评价药物的镇痛活性。 实验材料 实验动物：KM小鼠3只。 实验器材：电子秤、注射器、小鼠灌胃针、小鼠笼。 药品与试剂：对乙酰氨基酚制剂、0.1%盐酸吗啡溶液、0.6%冰醋酸溶液或0.05%酒石酸锑钾溶液、0.9%生理盐水、苦味酸溶液。 方法与步骤 取小鼠3只，称重后，用苦味酸标记。1号鼠灌胃对乙酰氨基酚（参考剂量为200 mg/kg），2号鼠灌胃等容量生理盐水溶液，3号鼠按0.15 mg/10 g剂量皮下注射盐酸吗啡，半小时后，各鼠分别腹腔注射0.6%冰醋酸溶液0.1 ml/10 g(或0.05%酒石酸锑钾溶液0.1 ml/10 g)，记录20 min内小鼠扭体次数，扭体反应的表现为腹部收缩，躯体扭曲，后肢伸展及蠕动等。 统计与处理 汇集全实验室的结果，按下列公式计算药物对扭体反