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酵母表达系统 酵母是一类低等的单细胞真核生物，作为一种外源基因的表达系统相对于其他表达系统的优势在于，它既具有真核细胞的特性又具有类似于原核细胞的生长特点。 酵母系统包括多种细胞因子、多肽激素等。 酵母系统表达外源基因的优点在于原核表达系统相比酵母是真核生物，可对表达的蛋白进行修饰，有利于保持生物产品的活性和稳定性；而且可将表达系统的产物分泌到胞外不仅有利于产品的纯化，还避免地表达系统的过度积累对宿主产生不利影响；而对哺乳动物细胞表达系统相比酵母更易于培养，可进行大规模的发酵生产，故在表达外源蛋白，特别是大分子真核生物蛋白方面得到了广泛的应用。 酵母表达系统载体 酵母表达系统的载体一般用穿梭载体，穿梭载体可以在酵母和大肠杆菌中进行复制，它是由酵母野生型质粒、抗性基因、宿主染色体DNA上自主复制序列（ARS）、中心粒序列（CEN）、端粒序列（TEL）等组成的。 酵母中用于表达外源基因的常用表达载体一般可以分为两种，即整合体型表达载体和附加体型表达载体。 常用的酵母表达系统 酿酒酵母表达系统 甲醇营养性酵母表达系统 裂植酵母表达系统 在酵母中表达外源基因的步骤 1、外源基因克隆 2、转化酵母菌 3、筛选并鉴定转化子 4、外源蛋白的诱导表达 昆虫细胞表达系统 概念：昆虫杆状病毒表达系统是目前国内外十分推崇的真核表达系统。利用杆状病毒结构基因中多角体蛋白的强启动子构建的表达载体，可使很多真核目的的基因得到有效甚至高水平的表达。BEVS应用于外源蛋白表达的主要优点是：它具有真核表达系统的翻译后加工能力，如二硫键的形成、糖基化及磷酸化等，使重组蛋白在结构和功能上更接近天然蛋白；其最高表达量可达昆虫细胞蛋白总量的50%；可表达非常大的外源性基因；具有在同一个感染昆虫细胞内同时表达多个外援金银的能力；对脊椎动物是安全的。 杆状病毒表达载体的构建方法 将目的基因克隆到合适的载体，置于杆状病毒启动子控制之下。 用重组的转移载体和相应的野生型或改造过的野生型杆状病毒DNA共转染昆虫细胞。 筛选重组病毒。 扩增病毒以进行大规模的蛋白生产。 纯化表达的外源蛋白。 哺乳动物细胞表达系统 按照宿主细胞的类型，可将基因表达系统大致分为原核、酵母、植物、昆虫和哺乳动物细胞表达系统。与其它系统相比，哺乳动物细胞表达系统的优势在于能够指导蛋白质的正确折叠，提供复杂的N型糖基化和准确的O型糖基化等多种翻译后加工功能，因而表达产物在分子结构、理化特性和生物学功能方面最接近于天然的高等生物蛋白质分子。从最开始以裸露DNA直接转染哺乳动物细胞至今的30余年间，哺乳动物细胞表达系统不仅已成为多种基因工程药物的生产平台，在新基因的发现、蛋白质的结构和功能研究中亦起了极为重要的作用。本文主要从表达系统及其两个组成部分——表达载体和宿主细胞等方面，简要介绍哺乳动物细胞表达系统和相关的研究进展。  研究现状 ①部分蛋白在哺乳动物细胞中的表达已从实验室研究迈向生产或中试生产阶段。②已有许多重要的蛋白及糖蛋白利用哺乳动物细胞系统表达和大量制备、生产。如人组织型血纤蛋白酶原激活因子、凝血因子Ⅷ、干扰素、乙肝表面抗原、红血球生成激素、人生长激素、人抗凝血素Ⅲ，集落刺激因子等。有些产品已投入临床应用或试用。③虽然经过多年努力，哺乳动物细胞表达系统的表达水平有大幅度增高，但从整个水平上看仍偏低，一般处在杂交瘤细胞单克隆抗体蛋白产率的下限，即1-30μg/l08细胞/24小时。有人认为其限速步骤可嚣是在工程细胞中(对于重组蛋白来讲，常是异源的)，重组蛋白的分泌效率较低。  转基因植物表达系统 自从20世纪80年代初利用植物基因工程技术获得转基因植物以来，植物生物技术得到了快速发展。伴随着植物生物技术发展，植物体作为生物反应器正在成为外源基因表达的重要体系，利用植物外源重组蛋白生成药用蛋白或疫苗是转基因植物研究的一个焦点。 转基因植物表达重组蛋白的一般步骤 1、基因的克隆 2、转化 3、表达 转基因植物表达系统的分类 1、稳定的整合表达系统 2、瞬时表达系统 3、叶绿体转化植物 转基因植物表达重组蛋白的优点 具有直接使用可食性植物原料的可能性 植物是一个能进行大规模生产的廉价生产系统，在获得稳定遗传的转基因植株后，扩大耕种面积就能提高蛋白的产量，随着种植面积的增加，产量可按比例快速增加。 植物具有完整的真核细胞表达系统，可加工多聚体蛋白 因为植物不充当人类病原体的宿主，因此更具安全性 转基因动物表达系统 将外源重组基因转染并整合到动物受体细胞基因组中，从而形成在体表达外源基因的动物，称为转基因动物。转基因动物表达系统，包括外源基因、表达载体和受体细胞等，基因组的转移则是细胞核移植和动物克隆技术，人工合成与设计基因、全基因乃至基因组的转基因技术是合成生物学。 转基因动物的概念