吸光光度法10秋经典教程.ppt

可见，适宜的酸度是吸光光度法成败的关键。 确定合适的酸度的实验方法： 将待测组分浓度及显色剂浓度固定，仅改变介质酸度并测定响应吸光度。然后以A对pH作图，得酸度曲线： 从曲线中选择较为平坦的区间。 2.显色剂用量 为了使显色反应进行完全，需加入过量的显色剂溶液。但也不是加的越多越好，否则会发生副反应，对测定不利。 确定合适的显色剂用量的试验方法类似酸度试验。最终由所得数据绘制A对显色剂用量关系曲线： 从曲线平坦部分选择合适的显色剂用量 v/ml 有时会遇到如下特殊情况：随显色剂用量的增加，溶液吸光度与显色剂用量之间的关系曲线达到平坦后，出现下降趋势，或甚至不出现平坦区域： v/ml v/ml 遇到类似情况时，更应严格控制显色剂用量，以免使测定结果不准确。 3.显色反应温度 通常显色反应在室温下进行，但有限显色反应必须加热才能反应完全。具体可采用如同上面的方法绘制A对温度关系曲线来选择适应的显色反应温度。 4.显色反应时间 显色反应有的可瞬间完成，但有的需要放置一定时间才能显色完全。放置（显色反应完全所需）时间不够，反应不完全，测定结果不准确；放置时间过长，同样测定结果不准确。具体也是要采取类似上述的试验方法确定合适的放置时间。测定应当在显色反应完全之后，稳定存在时间之内进行。 测定应在显色反应完全oa之后、稳定存在时间ab之内进行 t/min 5.溶剂 有些显色反应如果在有机溶剂中进行，常常可降低反应生成的有色物质的溶解度，使显色反应的灵敏度提高，进而提高测定的灵敏度。 如：三氯偶氮氯膦与Bi3+在H2SO4（或HClO4）介质中显色时，产物的ε为9.0×104 L·mol-1·cm-1，加入乙醇后， ε可提高一个数量级到1.1 ×105 L·mol-1·cm-1，灵敏度提高近1/5 。 6.共存离子的影响 当共存离子本身有颜色或共存离子与显色剂反应生成有色物质，均会影响测定结果的准确度。消除干扰离子的常用方法有五： *控制介质条件 有些干扰离子在强酸条件下不与显色剂反应生成有色物，利用此可消除干扰。如 二苯硫腙测定Hg2+时，铜锌铅铋钴镍的干扰。 *加入掩蔽剂 *利用氧-还反应，改变干扰离子价态 测铝时Fe(III)干扰可用Vc先还原Fe（II） *利用参比溶液消除干扰离子或共存离子干扰 *采用适当分离方法 消除干扰离子的常用方法有哪些？ 吸光光度法是以吸收定律为基础的分析方法，为了获得可靠的测定数据、准确的测定结果。除严格控制显色反应的条件外，还应选择好测量条件。 吸光光度法的测量条件主要有： 测定波长的选择 参比溶液的选择（在此不讲，见后面） 吸光度范围的选择 1.如何选择测定波长 因为待测组分在吸收曲线最大吸收波 长处ε值最大，测定灵敏度较高，并且在该波 长附近的小范围内，A随λ的变化不大，使测定 有较高的准确度。 应当在吸收曲线的基础上， 依据两个原则：最大吸收、最小干扰。 两组分吸收曲线互不重叠 无干扰 A λ 吸光光度法的测量条件有哪些？ a.丁二酮肟镍 b.酒石酸铁 两吸收峰有重叠 就有干扰 例外的情况：如果测定某组分a时，在其最大吸收波长470nm处，共存干扰组分b也有吸收，则改用a的其它谱线，如520nm线,这样可以提高方法的准确度和选择性。 2.吸光度范围的选择 先看一组数据 不同透光率（或吸光度）读数值时，浓度测量的相对误差（ ） 透光率T% 吸光度A 浓度测量的相对误差 ，% △T=1% △T=0.5% 95 90 80 70 60 50 40 36.8 30 20 10 5 2 1 0.022 0.045 0.097 0.155 0.222 0.301 0.398 0.434 0.523 0.699 1.000 1.300 1.700 2.000 ±20.5 ±10.6 ±5.60 ±4.00 ±3.26 ±2.88 ±2.72 ±2.72 ±2.76 ±3.10 ±4.34 ±6.70 ±12.70 ±43.8 ±10.2 ±4.74 ±2.80 ±2.00 ±1.63 ±1.44 ±1.36 ±1.36 ±1.38 ±1