海蓬子标准组分制备及其物质基础研究-制药工程专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 独 创 声 明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的 研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其 他 人 已 经 发 表 或 撰 写 过 的 研 究 成 果 ， 也 不 包 含 未 获 得 （注：如没有其他需要特别声明的，本栏可空）或其他教育机构的学位或证书使 用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明 确的说明并表示谢意。 学位论文作者签名： 签字日期： 年 月 日 --------------------------------------------------------------------- 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，并同意以下 事项： 1、学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许 论文被查阅和借阅。 2、学校可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以 采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权清华大学“中 国学术期刊(光盘版)电子杂志社”用于出版和编入 CNKI《中国知识资源总库》， 授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》。 （必威体育官网网址的学位论文在解密后适用本授权书） 学位论文作者签名： 导师签字： 签字日期： 年 月 日 签字日期： 年 月 日 海蓬子标准组分制备及其物质基础研究 摘要 本文首次对北美海蓬子的标准组分进行了提取分离，建立了一套系统提取分 离海蓬子组分的标准方法和标准组分库；主要运用高效液相色谱技术对提取分离 所得到的标准组分进行了高效液相色谱分析；对标准组分的抗凝活性、抗氧化活 性进行了研究。为海蓬子的相关活性研究以及在药物、保健品方面的研究开发提 供了物质基础和技术经验。 提取部分采用速度快、提取效率高的超声波辅助溶剂提取法。水溶性组分针 对多糖进行提取，分别采用超声辅助水提、超声辅助碱提以及超声辅助酶提三种 方法进行提取，对水提组分和酶提组分直接冻干，碱提组分醇沉干燥得到粗多糖。 其他提取组分分别用 95%乙醇、乙酸乙酯、氯仿和石油醚等不同极性溶剂，超声 波辅助溶剂提取，蒸干即得标准组分。水溶性组分和石油醚组分不再进行分离。 乙醇提取组分采用溶剂分配法进行分离，先后用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行 萃取，蒸干得到溶剂分配组分。乙酸乙酯提取组分和氯仿提取组分则分别用硅胶 柱进行分离，得到硅胶柱分离组分。以上组分共同构成了海蓬子标准组分库，共 得到 29 种标准组分。 对组分进行化学分析以研究其物质基础，本实验主要采用高效液相色谱法 （HPLC）对 29 种标准组分进行分析。按照文献中已有的单糖组成分析方法，对 3 种粗多糖成分进行单糖组成研究，水解衍生后进行 HPLC 分析，用乙腈-水作 为流动相进行分析，得到分离效果好的液相图谱。其他 26 种组分建立统一的液 相方法进行分析，并用紫外串联蒸发光散射检测器（DAD-ELSD）进行检测，流 动相为甲醇-水体系，得到分离效果好的液相图谱。 对提取标准组分进行部分药理活性研究，主要包含：1、体外抗凝血活性研 究，利用 APTT 试剂盒测定活化部分凝血活酶时间，并用肝素钠作为阳性对照。 结果发现，北美海蓬子水溶性组分、乙醇提取组分、乙酸乙酯提取组分、氯仿提 取组分和石油醚提取组分均未明显延长凝血时间，表明其无明显抗凝血活性。因 此，本实验不再对分离组分进一步研究。2、抗氧化药理活性研究，分别采用·DPPH 自由基清除实验、水杨酸法羟基自由基（·OH）清除实验以及邻苯三酚自氧化法 超氧自由基（·O2-）清除实验研究组分抗氧化活性，并用 L-抗坏血酸（VC） -或丁基羟基茴香醚（BHA）作为阳性对照。结果发现，北美海蓬子各极性提取 标准组分均有明显的抗氧化活性，但清除效果均弱于阳性对照。其中，组分对·OH 自由基有明显清除活性，在 8 mg/mL 浓度时抑制率均低于 80%；浓度为 5 mg/mL 的各组分对·DPPH 自由基的清除率均在 80%以上，其中活性最强的为 95%乙醇 提取组分；各提取组分未表现出·O2 清除活性，对邻苯三酚自氧化具有促进作用。 关键词：海蓬子；组分库；高效液相色谱；抗氧化活性 - 6 The preparation of the standard components and the study of the meterial base of the Salicornia bigelovii Torr. Abstract In this article, standard components of different polari