中药制剂含量测定.pptVIP

思考题 方法学考察内容包括哪几项？ 样品提取分离常见的方法有哪些？ 色谱法的定量分析方法是怎么操作的？ 用于定量分析时需对曲线进行处理： 曲线较直法：岛津CS系列采用该法。该法特点：需知SX值，根据SX值，将Kubelka-Munk曲线校正为直线。 计算机回归法：Camag仪器采用该法。由计算机根据最小二乘法原理对标准品测定值进行相关分析，得到最佳回归方程。不需要SX值。 薄层吸收扫描法 第三节 常用定量分析方法 薄层扫描法 薄层荧光扫描法 第三节 常用定量分析方法 薄层扫描法 基本原理：F=KC 光源：氙灯或汞灯。 灵敏度：最低可测到10 ～ 50 pg。 适用范围：适合于本身具有荧光或经过适当处理后可产生荧光的物质的测定。 Kubelka-Munk理论不适用于薄层荧光扫描，无需进行曲线校直。 考察内容： 标准曲线考察 分离度考察 重复性考察 准确度考察 第三节 常用定量分析方法 薄层扫描法 新建薄层扫描定量方法必须进行方法考察，以说明新建方法的可靠性。 第三节 常用定量分析方法 薄层扫描法 适于用Kubelka-Munk曲线校直法进行定量校准的仪器 ①检查所选择的散射参数SX值是否适宜。SX值适宜则工作曲线被校为直线，否则，调整SX值再校正，直至工作曲线成直线为止。 ②考察工作曲线是否过原点，以确定采用一点法或二点法定量。 ③确定点样量的线性范围。即使采用曲线校直，也只是在一定点样量范围内工作曲线为直线，因此需确定点样量的上、下限。 第三节 常用定量分析方法 薄层扫描法 定量峰与相邻峰之间较好分离，分离度（R）应大于1.0 按拟定的含量测定方法，对同一批样品进行多次测定（平行试验至少6次以上），计算相对标准差，RSD应不大于3%。 至少需要6次试验，在供试品中加入纯品，测定其含量。 加样回收率要求在95%～105%之间。 回归曲线法 内标法 外标法 外标一点法 外标两点法 第三节 常用定量分析方法 薄层扫描法 ①外标一点法 工作曲线通过原点时可用外标一点法定量。只需点一种浓度的标准品溶液，与供试液同板展开，对比，测定组分含量，其计算公式为： C=F1·A 式中：C为组分的重量或浓度，A为测得该组分的峰面积，F1为直线的斜率。 第三节 常用定量分析方法 薄层扫描法 薄层色谱扫描最常用的定量方法 ②外标二点法 工作曲线不通过原点时，只能用外标二点法定量，至少需点二种不同浓度的标准溶液（或一种浓度两种点样量），才能决定一直线,其计算公式为： C=F1A+F2 式中：C、A同前，F1为直线的斜率或比例常数，F2为纵坐标的截距，F1和F2值由仪器自动算出。 第三节 常用定量分析方法 薄层扫描法 注意事项： 点样量必须准确 宜用定量毛细管点样。 采用随行标准法，即供试品与标准品交叉点在同一板上； 为减小误差 同一薄板上供试品点样不得少于4个，对照品每一浓度不得少于2个； 调整供试品与标准溶液的点样量，使其峰面积相接近； 第三节 常用定量分析方法 薄层扫描法 外标两点法 外标一点法 应用范围 ：主要用于测定含挥发油及其他挥发性组分的含量。气相进样量小 第三节 常用定量分析方法 气相色谱法 理论塔板数n：对柱效高低的评价指标，n高，则柱效高，分离效果好。理论塔板数低于规定值，则要考虑更换色谱柱。 速率理论：说明色谱柱、载气、柱温等对柱效的影响。 分离度R：R≥1.5时，表明两峰完全分离。 系统适应性实验：理论塔板数、分离度、重复性、拖尾因子等。 实验条件的选择：固定相、柱温、载气等。 定量分析方法：归于化法、外标法、内标法。 优点：可抵消仪器稳定性差、进样量不够准确等原因所带来的定量分析误差。 缺点：样品的配制麻烦，选择化学结构、物理性质与待测组分相似的纯品作为内标物不易寻找。 气相色谱法 第三节 常用定量分析方法 内标法 内标物的选择原则： ①应是样品中不存在的纯物质。②加入量应接近于被测成分。③其色谱峰应位于被测成分色谱峰附近且与之完全分离。 同一检测器对不同物质具有不同的响应值，故不能用峰面积直接计算的被测成分的含量，要引入校正因子（f ）。 药典中采用的是相对重量校正因子（fw）. 即被测成分单位峰面积所相当的物质量（Mi/Ai）是内标物单位峰面积所相当的物质量（Ms/As）的多少倍。 Mi/Ai fw = Ms/As 内标法加校正因子 气相色谱法 第三节 常用定量分析方法 内标法 As Ci = f Cs Ai 校正因子经常不知，可采用药典方法测定校正因子再用内标法.