过继转移日本血吸虫感染小鼠CD8α-树突状细胞通过IL-10抑制OVA诱导的过敏性哮喘-基础医学专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下独立进行研究工作取 得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容和致谢的地方外，论文中不 包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，与我一同工作的同志 对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。 学位论文作者签名： 日期： 2015 年 5 月 30 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解天津医科大学有关保留、使用学位论文的规定， 即：学校有权将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，并采用 影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有 关部门或机构送交论文，并编入有关数据库。 本论文属于 必威体育官网网址 ，在 年解密后适用本授权书。 不必威体育官网网址 √ 。 （请在相对应的方框内打“√” ） 学位论文作者签名： 日期： 2015 年 5 月 30 日 导 师 签 名 ： 日期： 2015 年 5 月 30 日 天津医 天津医科大学硕士学位论文 中文摘要 目的： 探究日本血吸虫（SJ）感染小鼠哪种树突状细胞（DC）亚群对抑制 OVA 诱 导的过敏性哮喘有关键作用，并研究其抑制作用的机制。 方法： 取 SJ 感染小鼠和正常小鼠各 10 只，采用 MACS 方法从脾脏中提取 CD8α+DC 和 CD8α-DC，分别表示为：NCD8α+DC，NCD8α-DC,SJCD8α+DC，SJCD8α-DC。 另取 24 只小鼠，随机分为 4 组：Normal 组、Asthma 组、SJCD8α+组和 SJCD8α- 组。SJCD8α+组：过继转移 SJCD8α+DC 后，用 OVA 诱发哮喘的小鼠；SJCD8α- 组：过继转移 SJCD8α-DC 后，用 OVA 诱发哮喘的小鼠；Asthma 组：不过继转 移 DC,仅与 SJCD8α+组和 SJCD8α-组小鼠在同一时间用 OVA 诱发哮喘的小鼠； Normal 组：正常对照小鼠，不过继转移 DC,也不诱发哮喘。对 SJCD8α+组、 SJCD8α-组和 Asthma 组小鼠诱发哮喘结束后，处死各组小鼠。 1. 取肺组织，制作石蜡切片，HE 染色后,观察各组小鼠肺组织病理变化。 2. 分别提取 NCD8α+DC，NCD8α-DC,SJCD8α+DC，SJCD8α-DC 的总 RNA，反 转录为 cDNA,采用 q-PCR 的方法检测 DC 亚群 IL-12 和 IL-10 mRNA 水平。 3. 收集各组小鼠的支气管肺泡灌洗液（BALF），用 ELISA 法检测各组小鼠 BALF 中 IL-10 蛋白水平。 4. 取各组小鼠脾脏，制备脾细胞悬液，在一定浓度 OVA 的刺激下，对脾细胞 进行体外培养。72h 后，收集脾细胞培养上清（SCS），用 ELISA 方法检测 各组小鼠 SCS 中 IL-10 蛋白水平。 结果： 1. 与 Asthma 组小鼠相比，SJCD8α+组小鼠肺组织病理性炎症减轻：肺间质仍 有炎细胞浸润，支气管管腔可见黏液潴留，但管壁较完整，增厚不明显。然 而，与 Asthma 组和 SJCD8α+组小鼠相比，SJCD8α-组小鼠肺组织病理性炎症 明显减轻：肺间质炎性细胞浸润明显减轻，支气管管壁完整，增厚不明显， 管腔内黏液潴留少见。过继转移 SJCD8α-DC 对过敏性哮喘的抑制作用强于 SJCD8α+DC。 I NCD8α+DC、NCD8α-DC、SJCD8α+DC 和 SJCD8α-DC 的 IL-12 mRNA 水平 分别为 23.14±0.40、18.74±2.92、37.96±1.36 和 25.34±4.31（GAPDH%）， SJCD8α-DC IL-12 mRNA 表 达 水 平 低 于 SJCD8α+DC （ P0.01 ）， 与 NCD8α+DC 、 NCD8α-DC 相比 无 明 显 差 异 。 NCD8α+DC 、 NCD8α-DC 、 SJCD8α+DC 和 SJCD8α-DC 的 IL-10 mRNA 水平分别为 79.74±1.39 、 89.50±13.95、103.17±3.69 和 172.68±29.39（GAPDH%），SJCD8α-DC IL-10 mRNA 表达水平高于 NCD8α-DC 和 SJCD8α+DC（P0.05，P0.05）。 Normal 组、Asthma 组、SJCD8α+组和 SJCD8α-组小鼠 SCS 中 IL-10 蛋白水 平分别为（142.23±11.96）pg/ml、（164.42±26.47）pg/ml、（254.16±26.28） pg/ml 和（841.53±9.49）pg/ml。SJCD8α-组小鼠 S