含胍基基团的蛋白质印迹聚合物的合成及应用研究-材料工程专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 南开大学学位论文使用授权书 本人完全了解《南开大学关于研究生学位论文收藏和利用管理办法》关于南开大学(简 称“学校”)研究生学位论文收藏和利用的管理规定，同意向南开大学提交本人的学位论文 电子版及相应的纸质本，并委托印刷存档论文。 本人了解南开大学拥有在《中华人民共和国著作权法》规定范围内的学位论文使用权， 同意在以下几方面向学校授权。即： 1.学校将学位论文编入《南开大学博硕士学位论文全文数据库》，并作为资料在学校 图书馆等场所提供阅览，在校园网上提供论文目录检索、文摘以及论文全文浏览、下载等 信息服务； 2.学校可以采用影印、缩印或其他复制手段保存学位论文；学校根据规定向教育部指 定的收藏和存档单位提交学位论文； 3.非公开学位论文在解密后的使用权同公开论文。 4.同意学校将本人向有关电子出版单位授权的学位论文(含电子版和授权书)转交相关 授权单位。 本人承诺：本人的学位论文是在南开大学学习期间创作完成的作品，并已通过论文答 辩；提交的学位论文电子版与纸质本论文的内容一致，如因不同造成不良后果由本人自负。 本人签署本授权书一份，交图书馆留存。 学位论文作者暨授权人(亲笔)签字： 靳素素 20 15 年 5 月 26 日 南开大学研究生学位论文作者信息 论 文 题 目 含胍基基团的蛋白质印迹聚合物的合成及应用研究 姓 名 靳素素 学号 2120120823 答 辩 日 期 2015 年 5 月 26 日 论 文 类 别 博士 □ 学历硕士 □ 专业学位硕士 □√ 同等学力硕士 □ 划 √ 选择 学院 ( 单位 ) 化学学院 学科 /专业 (专业学位 )名称 材料工程 联 系 电 话电子邮箱 HYPERLINK mailto:manman1965@ manman1965@ 通信地址(邮编)： 南开大学化学学院 300071 非公开论文编号 备 注 注：本授权书适用我校授予的所有博士、硕士的学位论文。由作者填写一份并签字后交校图书馆，如已批准为非公开学 位论文，须附批准通过的《南开大学研究生申请非公开学位论文审批表》和“非公开学位论文标注说明”页。 摘要 摘要 摘要 蛋白质印迹技术是一种合成具有特殊识别位点的人工仿生受体的技术。蛋 白质印迹聚合物具有低成本和可重复使用等优点，因此，蛋白质印迹聚合物的 研究发展非常迅速。但是，由于蛋白质性质不稳定，如对温度和有机试剂比较 敏感，以及考虑到模板蛋白质的获取问题，目前大多数蛋白质印迹都是以性质 相对稳定且商品化的在细胞中含量较高的蛋白质作为模板，而对于在细胞中含 量较少，例如只占细胞液中总蛋白量的万分之几或者更少的微量蛋白质的印迹 则鲜有报道。这些微量蛋白质对于人体有着举足轻重的作用，如免疫球蛋白重 链结合蛋白(BiP)在内质网体中的含量只有 0.059%，但对于蛋白质的折叠和转运 起着重要作用。因此，建立一种有效的微量蛋白质印迹聚合物的合成方法是非 常必要的。 胍基可以与氨基酸形成多重氢键，氢键具有方向性和饱和性。同时，胍基 的 pKa 值较高，胍离子在较大 pH 范围内都带正电荷，与带负电的氨基酸存在静 电作用。基于此，我们设计合成了两种新型的带有胍基识别基团的辅助识别聚 合物链(ARPCs)，分别以这两条 ARPCs 作为辅助功能单体，以通过克隆技术获 取的克隆 BiP 为模板，通过表面印迹法制备 BiP 的印迹聚合物（PIPs），并研究 了 PIP 对猪肝内质网体(ER)提取物中微量蛋白质 BiP 的富集能力和重复使用性 能。两种 PIPs 都能够对含量仅为 0.059%的 BiP 进行识别和富集，富集倍数分别 可达到 40 倍和 100 倍。此外，两种印迹聚合物都具有良好的重复利用性能，有 望在蛋白质识别和蛋白质纯化中得到应用。 关键词：蛋白质印迹聚合物（PIP）；辅助识别聚合物链（ARPCs）；胍基识 别基团；内质网体；免疫球蛋白重链结合蛋白(BiP) I Abst Abstract Abstract Protein imprinting technology is a promising tool for generating artificial biomimetic receptors with antibody-like specific recognition sites. Because of their many advantages, such as low cost and reusability, molecularly imprinted polymers (MIPs) have been increasingly developed. However, only stable, comme