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海洋微藻中鞘脂分布变化的研究-海洋生物学专业论文.docxVIP

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万方数据 万方数据 独 创 性 声 明 本人郑重声明:所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工 作及取得研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方 外,论文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果,也不包含为获得 宁波大学或其他教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我一同工作 的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明并表示了 谢意。 若有不实之处,本人愿意承担相关法律责任。 签名: 日期: 关于论文使用授权的声明 本人完全了解宁波大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校 有权保留送交论文的复印件,允许论文被查阅和借阅;学校可以公布论 文的全部或部分内容,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。 (必威体育官网网址的论文在解密后应遵循此规定) 签名: 导师签名: 日期: 宁波大学硕士学位论文 海洋微藻中鞘脂分布变化的研究 摘 要 运用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间-质谱联用分析系统(UPLC-Q-TOF-MS)直 接分析海洋微藻中的总脂,并建立了微藻中各类鞘脂的精确结构的鉴定方法。在正离子 模式下,根据二级 质谱 图上的特 征碎片 离子 和中性丢 失 可以 确定 鞘脂的长 链碱基 、 酰 胺 基 链 和 极 性 头 部 基 团 , 最 终 确 定 微 藻 中 鞘 脂 的 种 类 和 具体 结构 。 利用已建立 的鞘脂的分析方法对 3 个门的 16 种微藻中鞘脂的种类和组成进行分析,其中包括 10 种 硅藻,3 种甲藻和 3 种定鞭藻。结果表明,16 种微藻中共鉴定出 4 类鞘脂,包括 29 种 神经酰胺、13 种单糖鞘脂、15 种双糖鞘脂和 18 种三糖鞘脂。经比对分析发现,鞘脂的 结构组成,包括长链碱基、酰胺基链和糖基在同一个门的藻中变化不大,不同门之间变 化较大。d18:0、d18:1、d18:2、d18:3 和 d18:4 长链碱基主要在硅藻中,t18:3、d19:2 和 t18:4 长链碱基在甲藻中发现,而 d19:3 和 d19:4 长链碱基仅在定鞭藻中检测到。硅藻中 的酰胺基链的碳原子全部为偶数个,包括 C14、C16、C18、C22、C24 和 C26,且都不 存在羟基;定鞭藻中所有的酰胺基链都带有一个羟基,碳原子数为 22~24 个。此外,双 糖鞘脂和三糖鞘脂仅在硅藻中检测到。鞘脂的这些特征组成均可以作为该微藻门的生物 标记物,有助于微藻 种类的区 分和定 种,特别是对 于一些 形态 学相似的 微藻种 类。 在 总 脂 中 加 入 鞘脂 标 准 品 作 为 内 标 对 不 同 生 长 期 的 各 类 鞘 脂 进 行 半 定 量 分 析 发 现,细胞 在由对 数期 到平台末 期生长 过程 中,微藻 中无论 神经 酰胺、单 糖鞘脂 、 双 糖 鞘 脂 还 是 三 糖 鞘 脂 的 含 量 整 体 变 化 是 一 样 的 : 对 数 期 含 量 最 低 , 从对数期到 平台期时神经酰胺和鞘糖脂呈现上升的趋势,但变化不大;到达平台末期时整体出现快 速上升的趋势。总之,研究不同微藻鞘脂组成的变化及其不同生长阶段鞘脂含量的变化, 不仅可以了解到它们在生长过程中经历的不同生化过程,而且可以通过研究这些变化为 微藻的生理生态学研究、化学分类学研究和赤潮的预防和防治提供重要指导意义。 关键词 :微藻, 鞘脂, 生 长期, 结构 多样性, UPLC-Q-TOF-MS I 海洋微藻中鞘脂分布变化的研究 Sphingolipid distribution changes in marine microalgae Abstract The method of analyzing sphingolipids in microalgae was established using Ultra Performance Liquid Chromatography-Electrospray ionization-Quadrupole-Time of Flight Mass Spectrometry (UPLC-ESI-Q-TOF-MS). In the positive mode, the long chain base, N-acyl residue and polar head group of sphingolipid were identification based on the characteristic fragment ions and neutral loss yielded by ESI-MS2 analysis. In the present study, precise structural identification and quantitative profiling of

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