归脾丸对骨髓抑制小鼠造血调控的影响及机制探讨-人体解剖与组织胚胎学专业论文.docxVIP

成都中医药大学硕士学位论文 成都中医药大学硕士学位论文 PAGE PAGE 5 中文摘要 目的：肿瘤患者放、化疗后，骨髓造血功能受到损害，主要为血小板降低，白 细胞减少等骨髓抑制表现。为了提高肿瘤患者放、化疗后生存机会及生存质量， 更好地服务于临床，寻求能降低放、化疗毒副作用的中药复方制剂，本实验选择 临床运用中已初显成效的归脾丸对其补气益血的作用机制进行探讨，以期得到该 复方在造血调控及机制等实验数据的支持，为其临床用药和开发利用提供依据。 方法：在骨髓抑制小鼠模型上，应用外周血细胞计数、骨髓组织切片、造血祖 细胞培养、免疫组织化学、流式细胞术等技术，从外周血细胞、骨髓细胞及造血 祖细胞的存活、增殖、细胞周期等多方面、多层次较为系统地探讨归脾丸对骨髓 抑制小鼠造血调控的影响及其机制，为补气益血的中医理论提供实验室依据。 结果：1 归脾丸能明显促进骨髓抑制小鼠骨髓有核细胞( BMC) 数、造血组织面积、 外周血白细胞( WBC) 数、红细胞( RBC) 数、血红蛋白( Hb) 含量以及增加血小板 ( PLT) ，其中，中剂量组表现最佳； 2 归脾丸体内用药能促进骨髓抑制小鼠红系、粒系、巨核系三系造血干/ 祖细胞体外培养集落形成； 3 归脾丸能促使骨髓抑制小鼠造血干/ 祖细胞进入细胞增殖周期，使G0/ G1 期细胞比例减少，S期和G2/ M期细胞比例增加，归脾丸可增加骨髓细胞的增殖指 数( PI ) ； 4 归脾丸能增强骨髓抑制小鼠骨髓基质细胞的活性；通过促进骨髓基质 中FN、LN的表达，改善造血干/ 祖细胞的黏附和归巢，促进早期造血干/ 祖细胞的 增殖。 结论：归脾丸确能改善骨髓抑制小鼠的造血机能，具有促进模型组小鼠外周血 象及骨髓像恢复的作用；促进造血干/ 祖细胞的增殖及分化，并加速造血干/ 祖细 胞G0/ G1期细胞向S期细胞、S期细胞向G2/ M期细胞转化；增强骨髓抑制小鼠骨髓基 质细胞的活性，促进骨髓基质中FN、LN的表达，该复方通过以上途径促进骨髓抑 制小鼠骨髓造血功能的恢复。 关键词：骨髓抑制 造血 归脾丸 细胞周期 祖细胞 Abst r act Objective: hematopoietic disorder happened after the patients accepted radioactive and chemical therapy, which showed bone marrow suppression such as the decrease of platelet, reduce of WBC. In order to improve the opportunity and quality of life of tumor- patients after accepted radioactive and chemical therapy, serve for the better clinic treatment, and search for some formula of TCM which can reduce the toxic effect due to radioactive and chemical therapy. So this subject aims to explore the mechanism of GuiPI-Pill which showed its efficacy in clinic and get the support of experimental data on hematopoietic regulation and its mechanisms for the clinic use and exploitation hopefully. Methods : In the present study, the model of myelosuppressed mice is prepared. Peripheral blood cell count, myeloid tissue section, hemopoietic progenitor cell culture, immunohistochemistry and flow cytometry were used to analyze the survival and proliferation of HSCs, cell cycle of bone marrow nucleated cells and the expressions of apoptosis-related protein, respectively. We explored systematically and