寡聚精氨酸纳米复合物的构建和评价-药剂学专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 目 录 中文摘要1 英文摘要………………………………………………………………………4 英文缩写7 研究论文 寡聚精氨酸纳米复合物的构建和评价………………………8 第一部分 两亲性载体材料的合成 前言……………………………………………………………………..10 材料与方法……………………..………………………………………11 结果……………………………………………………………………..13 附图…………………………………………….……………………….14 讨论……………………………………………………………………..17 小结……………………………………………………………………..18 参考文献………………………………………………………………..19 第二部分 复合物载体的制备和表征 前言……………………………………………………………………..20 材料与方法……………………………………………………………..21 结果……………………………………………………………………..23 附图……………………………………………………………………..24 附表……………………………………………………………………..27 讨论……………………………………………………………………..30 小结……………………………………………………………………..32 参考文献………………………………………………………………..33 第三部分 载体和细胞相互作用 前言……………………………………………………………………..34 材料与方法……………………………………………………………..35 结果……………………………………………………………………..40 附图……………………………………………………………………..41 附表………………………………..……………………………………46 讨论……………………………………..………………………………48 小结…………………………………………..…………………………49 参考文献…………………………………………..……………………50 结论 …………………………………………………………………………52 综述 多功能信封型纳米载体研究进展53 致谢…………………………………………………………………………..63 个人简历……………………………………………………………………..64 中 中 文 摘 要 PAGE 10万方数据 PAGE 10 万方数据 寡聚精氨酸纳米复合物的构建和评价 摘 要 目的： RNA 干扰（RNA interference，RNAi）的发现，被认为是生物学中最 重要的发现之一。许多类型的疾病，包括病毒感染、癌症等已被证实可作 为 RNAi 治疗的潜在目标。在近十几年来，RNAi 在基因功能和基因治疗 方面的研究越来越受到人们的关注，逐渐发展成为一种较为成熟的技术。 但是，裸露 siRNA 稳定性差，易被体内的核酸酶降解，且自身的性质， 如分子量高、负电性、亲水性等阻碍了其跨膜转运，极大地限制了 siRNA 的进一步应用。因此如何高效地运输 siRNA 至靶细胞并有效的穿过细胞 膜释放到细胞质中成为人们研究的热点。 细胞穿膜肽是由 5-30 个氨基酸组成的阳性或两性的短肽，具有转染 活性高，生物活性好，低毒性等优点，而且其自身不仅能够高效的穿过细 胞膜进入细胞，也可以介导其他外源性的分子进入细胞，是目前快速发展 的一种新型药物载体。最近，细胞穿膜肽用于 siRNA 的细胞递送已经逐 渐成为人们研究的热点。但是作为 siRNA 的运输载体，细胞穿膜肽的摄 取效率低，且不易从内涵体内逃出，极大地限制了细胞穿膜肽的应用。因 此，为了提高 siRNA 摄取效率，需要对细胞穿膜肽进行修饰，使其能与 siRNA 更好地复合，使制剂更稳定，摄取效率大大提高。 本文构建了寡聚精氨酸（R8）与 siRNA 的纳米复合物，经过硬脂酰 化和聚乙二醇化分别合成了 STR-R8 和 STR-R8-PEG 两种不同的载体材 料，制备了 STR-R8/siRNA、STR-R8-PEG/siRNA 和 STR-R8-PEGn/siRNA 三种不同的纳米复合物。通过粒径、电位、电泳行为等评价不同处方的纳 米复合物，筛选出理化性质优良的处方。并以 MCF-7、HT-1080 和 Hela 细胞为模型，考察载体与细胞之间相互作用。 方法： 通过查阅文献及试验，确定了压缩材料 STR-R8 和 STR-R8-PEG 的合 成和纯化方法。在室温条件下，将 SA-NHS 与 CPP 搅拌反应 30 min，纯 净水透析 24 h，冷冻干燥后的产物即为 STR-R8。在室温条件下，将 STR-R8 与