贵阳地区几所医院病原性真菌感染的研究-微生物学专业论文.docxVIP

贵阳医学院 贵阳医学院 2012 届硕士研究生论文 贵阳医学院 贵阳医学院 2012 届硕士研究生论文 PAGE PAGE 13 PAGE PAGE 10 贵阳医学院微生物学教研室 研究生：马韵韵 导师： 王和 摘要 目的：了解贵阳地区几所医院病原性真菌的常见种类与分布及其分子流行病学，为临床真 菌感染的诊断和治疗提供参考依据。方法：采集贵阳市几所医院感染患者的呼吸道标本、 阴道分泌物标本共 167 例，分离培养的真菌分别用常规真菌学方法和 PCR 检测 ITS 序列方 法鉴定，比较两种方法的符合率。 结果：1.167 例感染患者的标本内共检出 189 株真菌，酵母菌 185 株（占 97.9%）和丝状 菌（霉菌）4 株（占 2.1%）。常规真菌学方法分别鉴定为白念珠菌 113 株、热带念珠菌 57 株、近平滑念珠菌 11 株、克柔念珠菌 4 株，烟曲霉 2 株、黄曲霉 1 株、黑曲霉 1 株。这些 菌株经 ITS 序列检测方法分别鉴定为白念珠菌 145 株、热带念珠菌 34 株、近平滑念珠菌 4 株、克柔念珠菌 2 株。两种方法相比较，白念珠菌符合率为 77.9%，热带念珠菌符合率为 59.6%，近平滑念珠菌符合率为 36.4%，克柔念珠菌符合率为 50.0%。 2. ITS 序列检测鉴定致病性真菌主要为白念珠菌（145 株，占 76.7%），其中女性生殖道感 染患者分离 96 株，肺炎患者分离 26 株，肺结核患者分离 9 株，肺脓肿患者分离 9 株，哮 喘患者分离 3 株，肺癌患者分离 2 株；其次是热带念珠菌（34 株，占 18.0%），其中女性生 殖道感染患者分离 20 株，肺炎患者分离 11 株，肺结核患者分离 3 株。白念珠菌以基因 A 型占多数（88 株，占 60.7%），其次分别为基因 B 型（41 株，占 28.3%）、基因 C 型（16 株 占 11.0%），未检出基因 D、E 型。167 例感染患者中女性生殖道感染者的病原性真菌检出率 占 63.5%，其次为肺炎患者检出率占 36.5%。这些病原性真菌感染患者绝大多数为单一酵母 菌感染（151 例，占 79.9%），未发现单一霉菌感染者。酵母菌复数菌感染 13 例（占 8.5%）， 酵母菌与霉菌混合感染 3 例（占 1.6%）。 结论：根据本文研究结果及文献报道，我们认为： 1.贵阳地区几所医院病原性真菌感染患者分离的真菌中，常见为白念珠菌（ 以基因 A 型为主，其次是基因 B 型、C 型）、热带念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌、烟曲霉、黑 曲霉、黄曲霉。其中白念珠菌占 76.7%，其次是热带念珠菌（占 18.0%）。多数患者是单一 的酵母菌感染（占 79.9%），霉菌常见与酵母菌混合感染。 2. 167 例病原性真菌感染中，白念珠菌在女性生殖道感染疾病中检出率最高，提示女 性是致病性真菌的常见易感者，其生殖道是常见感染部位，呼吸道疾病易出现复数真菌感 染。 3.检测 ITS 序列鉴定酵母样真菌通过分离单个菌落进行 PCR 反应和琼脂糖凝胶电泳， 通常需要 2 至 3 天，具有快速、简捷、可靠的优点，有助于酵母样真菌感染的快速诊断并 提高其鉴定的准确率以及基因型分析与研究。 关键词：真菌，感染，基因检测，实验室诊断， 白念珠菌 前言 真菌是一类有细胞壁，不含叶绿素，无根茎叶分化的真核细胞型生物。真菌以寄生或 腐生方式生存，少数为单细胞、多数为多细胞，能进行无性或有性生殖。真菌可分为微生 物真菌和大型真菌，按形态分为单细胞和多细胞两类。单细胞的微生物真菌主要为酵母菌 和酵母样菌，菌体呈圆形或椭圆形，其形成的菌落为酵母型或类酵母样型。多细胞的微生 物真菌由菌丝和孢子组成，菌丝分枝交织成团形菌丝体，并长有各种孢子，这类真菌被称 为丝状真菌或霉菌。真菌种类繁多，自然界估计有多达 150 万种，目前被识别和描述的真 菌约10 万种，与人类和动物疾病相关的约 500 种，能引起感染的致病性真菌约为 50 种[1]。 免疫抑制剂与抗菌药物的广泛应用、器官移植手术以及各种介入检查或治疗技术的开 展等因素，造成真菌感染增多并日趋严重的现象。因此真菌感染及其预防、诊断和治疗的 问题，也在临床上受到日益重视[2]。常规真菌学方法鉴定真菌通常依赖于染色形态学、分 离培养和生物化学反应，但由于耗时及准确率低给临床诊断和治疗带来了很大困难[3]。随 着分子生物学技术的发展，近年来许多国家已开始探讨和采用基因检测与分析的方法对真 菌进行研究、鉴定以及分类，使成为更加快速、准确、可靠的真菌鉴定方法,近年来 ITS 序列检测已成为热点，对研究真菌分布及基因型有很大帮助[4]。针对深部真菌感染日趋严 重、传统鉴定方法耗时准确率低及分子生物学技术的快速发展几个特点，本研究采集