广西肝癌高发区乙型肝炎病毒基因型、BCP前C区突变与肝癌的相关性研究-流行病与卫生统计学专业论文.docxVIP

2015届硕士毕业论文 广西肝癌高发区乙型肝炎病毒基因型、BCP/前C区突变与肝癌的相关性研究 个人简历 基本情况 姓名：郑丹 性别：女 民族：壮族 出生年月：1988-10 籍贯：广西来宾 政治面貌：中共党员 学习工作经历 起止时间 2007.9-2012.6 所在院校或单位 广西医科大学 学历学位 本科/学士 职称 无 2012.9-2015.6 广西医科大学 研究生/硕士 无 研究生期间科研经历 项目起止时间 项目名称 项目来源 本人承担任务 2013.1-2016.12 HBV基因型和准种优势株 对筛选广西肝癌高发区高 危人群的作用及其致癌机 制的研究 国家自然 科学基金 实验部分及数 据分析 2013.1 -2016.12 乙型肝炎病毒基因型和准 种在广西肝癌高发区肝癌 发生、发展的作用研究 广西高校 科学技术 研究重点 项目 实验部分及论 文撰写 目录 摘 要 1 ABSTRACT 3 前言 6 1 对象与方法 10 1.1研究对象10 1.2实验仪器及试剂10 1.2.1 主要仪器 10 1.2.2 主要试剂 11 1.3实验方法11 血清抗原标志物HBsAg、HBeAg检测 11 血清HBV DNA复制水平的检测 12 HBV DNA的提取 13 PCR扩增 15 1.3.5琼脂糖凝胶电泳 16 1.3.6测序 17 1 1.4 1.4 HBV 基因型的确定和突变点分析17 1.5统计学方法18 2 结果 19 2.1 研究对象基本情况19 HBV基因型 19 2.2.1 HBV基因型总体分布 19 2.2.2 HBV基因型在两组中的分布 21 HBV BCP/前C区突变 21 HBV BCP/前C区测序结果 21 HBV BCP/前C区突变情况 24 2.3.3 HBV突变在不同基因型、复制水平、HBeAg状态中的分布 24 2.3.4不同基因型、复制水平、HBeAg状态中两组患者HBV突变的比较 .25 2.4多因素分析27 2.5联合突变分析29 3 讨论 30 4 研究总结 36 附录 42 英文缩略词对照42 2 文献 文献综述 43 致谢 53 攻读学位期间发表的学术论文 54 3 2015届硕 2015届硕士毕业论文 广西肝癌高发区乙型肝炎病毒基因型、BCP/前C区突变与肝癌的相关性研究 广西肝癌高发区乙型肝炎病毒基因型、BCP/前C 区突变与肝癌的相关性研究 摘 要 目的 研究广西扶绥县肝癌高发区乙型肝炎病毒基因型、BCP/前C区突变与肝癌 发生的关系。 方法 用病例对照研究的方法，收集广西肝癌高发区53例HBV相关肝癌患者及70 例HBV慢性携带者的血清，提取HBV DNA，用巢式PCR法扩增 HBV S区、BCP/前C区，扩增产物纯化后测序，分析病毒基因型、BCP/前C区突变 与肝癌发生的关系。 结果 1. 本研究中研究对象均为B和C两种基因型，未发现其它基因型。B型占25.2% （31/123），C 型占74.8%（92/123），C型为广西扶绥肝癌高发区的主要流行毒株。B、C基因 型在不同年龄组、HBV DNA复制水平、HBeAg状态中的分布差异均无统计学意义（P 0.05）。病例组和对照组中均以C型为主，分别占77.4%(41/53)和72.9%(51/7 0)，两组中B基因型和C基因型的分布差异无统计学意义（P 0.05）。 2. BCP/前C区突变频率较高（10%）的位点有T1753C、A1762T/G1764A、A1775G 、C1799G 、T1802C/T1803G/C1804T 、A1846T 、T1858C、G1896A、G1899A。两组比较差异有统计学意义的有A1762T/G1764A 、A1775G和T1858C 3个位点。其中，病例组的突变率高于对照组的是A1762T/G1764A、T1858C， 突变率分别为94.3%vs.75.7%（P=0.006）和50.9% vs.31.4%（P=0.029）；对照组中的突变率高于病例组的是A1775G，突变率为28 .6%vs.13.2%（P=0.041），提示这三个位点的突变与肝癌的发生密切相关。 3. 多因素logistic回归分析纳入性别、年龄、基因型、HBV DNA复制水平、HBeAg状态以及A1762T/G1764A和T1858C、A1775G变异等相关 因素，结果显示，性别、年龄、A1762T/G1764A双突变、 T1858C突变和A1775G突变均与肝癌的发生相关。男性（OR=2.767，95% CI为1.101～6.954，P=0.030）、年龄大于或等于50岁（OR=2.412，95% CI为1.022～5.694，P=0.045）、A1762T/G1764A突变（OR=5.459