电转液L对绵羊成纤维细胞电转染条件优化.pdfVIP

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2019-04-12 发布于浙江
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电转液L对绵羊成纤维细胞电转染条件优化.pdf

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新疆农业科学2015，52(8)：1481—1485 Sciences XinjiangAgricultural doi：10．6048／j．issn．1001-4330．2015．08．018 电转液L对绵羊成纤维细胞电转染条件优化李炜杰1，杨娇1，王聪慧1，罗健2，周平2，黄威3 姚建龙4，何高明1，皮文辉2 (1．石河子大学动物科技学院，新疆石河子832000；2．新疆生产建设兵团绵羊繁育生物技术重点实验室，新疆石河子832000； 3．新疆生产建设兵团第五师91团，新疆博乐833307；4．伊宁县动物卫生监督所，新疆伊宁835100) 4卜Nu— 摘要：【目的】采用实验室配制的电转液L，优化绵羊成纤维细胞的转染效率。【方法】利用Lonza max绿色荧光蛋白表达质粒导人绵羊成纤维细胞中，通过流 cleofector设备，针对实验室配制的电转液L，将P 式细胞仪测定和荧光显微镜观测细胞转染效率。【结果】通过测定细胞转染效率，得到较佳电转方案：L电转液1001山L悬浮绵羊成纤维细胞，采用CZ一167电转程序，质粒浓度4g，2×106个细胞，电击一次，电转后37。C 放置10min可获得理想的转染效率。关键词：绵羊成纤维细胞；细胞转染；转染效率；条件优化中图分类号：$826 文献标识码：A 文章编号：1001—4330(2015)08—1481—05 forOvisAriesFibroblasts ofanElectrotransferSolution—L Optimization LI Jia01，WANG Jian2，ZHOU Wei3， Wei—jiel，YANG Cong—huil，LUO Pin92，HUANG YAO Wen—hui2 Jian—lon94，HEGao—min91，PI AnimalScienceand (1．Collegeof Technology，ShiheziUniversity，ShiheziXinfiang832003，China；2． and ofXPPC，Shihezi KeyLaboratoryofSheepBreedingDevelopmeritTechnology Xinfiang832000，China；3． The91th andAnimal FarmtheNinth Production Husbandry of Division， Agricultural Regimental Agricultural AnimalHealth XPCC，BoleXinjiang833307，China；4．YiningCounty hupection，YiningXinfiang835100， China) aimsto electrotransferof Abstract：【Objective】Theproject optimize efficiencysheepfibroblasts，using theL—solutionformulatedinour fluorescent