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大肠杆菌感受态细胞的制备;实验目的;;实验原理;;;;操作步骤;;制备感受态
(1)加200 μL 冰预冷的0.1M CaCl2到离心管中,振荡混匀,使菌体悬浮,冰浴30min。
(2) 4℃,5000rpm离心5分钟,弃上清,将管倒置于干滤纸上,吸干残留液体。
(3) 加50 μL冰预冷的0.1M的CaCl2,重悬浮菌体,放至4℃保存备用,24~48小时内使用效果较好。如果暂时不用,可加入等体积的 30%的甘油(甘油终浓度为15%),混匀。液氮速冻后保存于-80℃低温冰箱中待用,可保存半年以上。
;注意事项;注意事项;
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