测量不确定度在ELISA检测中的评定和应用.docVIP

. .. 测量不确定度在ELISA检测中的评定和应用 摘要：［目的］对测量不确定度在ELISA检测中的评定和应用作出探讨，提供一种表示ELISA检测结果质量的方法，并寻找改进ELISA检测质量的途径。［方法］分别使用GUM法和自上而下评定法对ELISA检测中的测量不确定度进行评定。［结果］应用GUM法举例评定测量不确定度得出：人血浆（清）HIV抗原抗体反应吸光度与cutoff比值（B）=4.335；U=1.3；k=2。应用自上而下评定法举例评定测量不确定度得出：人血浆（清）HCV抗体反应吸光度与cutoff比值=3.747；U=32.8；k=2。［结论］ELISA检测引入测量不确定度后，会更科学地判定检测结果，解决了“灰区”设定“难”的问题。通过分析各分量的相对贡献，可有效改进检测工作质量，提升实验室检测水平。通过设立目标不确定度，可严格控制检测结果质量，以达到预期的质量要求。 关键词：不确定度 ELISA 评定 Evaluation and application of measurement uncertainty in ELISA detection 【Abstract】Objective：To evaluate the role of measurement uncertainty in ELISA assay that provides a way of representation for the quality of results and improves the quality of the detection. Methods：Evaluate measurement uncertainty in ELISA test by using GUM and Top-down approach, respectively. Results：By GUM method, the absorbance value and cutoff value of the ratio in HIV antigen-antibody reaction of human plasma was 4.335，U=1.3 (k=2). Relatively, Using Top-down approach absorbance value and cutoff value of the ratio in HCV antibody reaction of human plasma was 3.747，U=32.8 (k=2). Conclusion：Measurement uncertainty is introduced to ELISA what makes results more scientifically and Solves the problems of “gray zone”. Analyzing relative contribution of various components of uncertainty on measurement results can improve work quality and enhance the level of laboratory testing. Setting the target uncertainty is help to quality control to achieve the ideal requirements. 【Key words】Measurement uncertainty; ELISA; Evaluation ELISA（酶联免疫吸附试验）是指以酶作为标记物、以抗原和抗体之间免疫结合反应为基础的固相吸附测定方法。测定中，抗原与抗体在固相支持物上结合反应，酶与其底物作用后，利用显色、产生荧光或发光强度与样本中待测物浓度的呈正比或反比关系进行结果判定。由于ELISA在方法上的特异性、灵敏性较高，操作上的简便性、试剂稳定性理想，目前已成为临床免疫检验中的主导技术，在血站血液检测中更是得到了广泛的应用。但是，ELISA检测中不精密性（CV%）较大且难于控制、设定“灰区”又难寻标准、检测结果的质量难以评价等问题一直困扰着检测人员。本文对测量不确定度在ELISA检测中的评定和应用作出探讨，寻找解决相关问题的方法，以提高ELISA检测的质量。 1 理论和方法 测量不确定度是对测量结果质量的定量表征，测量结果的可信程度在很大程度上取决其不确定度的大小，测量结果必须附有不确定度说明才是完整并有意义的。为了使用统一的准则对测量结果及其质量进行评定、表示和比较，1995年由ISO、IEC和IFCC等7个国际化组织联合修改公布了《测量不确定度表示指南》（GU