发酵过程控制6发酵染菌及其防治.ppt

7发酵过程控制 1 发酵工业的无菌处理 灭菌 消毒 除菌 防腐 2 发酵工业污染的防治策略 “死角”是指由于操作、设备结构或人为因素造成的屏障等原因，使蒸汽不能倒到预定的灭菌部位或该部位的冷空气不易在加热过程中排净，从而不能达到彻底灭菌要求的部位。 发酵罐的死角 管道安装不当或配置不合理形成的死角 3、前期染菌 种子带菌、培养基灭菌不彻底 4、中后期染菌 补料的料液灭菌不彻底或补料管道、阀门渗漏，一般不会是种子问题 5、污染杂菌种类 发酵染菌及其防治 五、染菌的防止 1、防止种子带菌 制备种子时对沙土管及摇瓶严格加以控制。 沙土制备时要多次间歇灭菌 注意接种时的无菌操作 子瓶、母瓶的移种和培养 无菌室和摇床间都要保持清洁。无菌室内要供给恒温恒湿的无菌空气，还要装紫外灯用以灭菌，或用化学药品灭菌。 发酵染菌及其防治 无菌室要求 在无菌室中装有紫外灯，打开紫外灯，照半小时，关灯后15分钟再接种。 用消毒药水如新洁而灭配成1/1000浓度擦桌子、拖地，开启超净台的通风， 接种时必须在超净台上操作，超净台装有一台鼓风机，进风口有一粗过滤器，出风口有高效过滤器，保证无菌风从超净台吹出，外界有菌空气不可能进入接种区域，保证无菌条件。 接种人员必须穿好无菌服，戴好口罩，手用酒精棉球擦干净。 发酵染菌及其防治 2、防止设备渗漏及“死角” 发酵设备及附件由于化学腐蚀、电化学腐蚀，物料与设备摩擦造成机械磨损以及加工制作不良等原因会导致设备及附件渗漏。 设备上一旦渗漏，就会造成染菌，例如冷却盘管、夹套穿孔渗漏，有菌的冷却水便会通过漏孔而进入发酵罐中招致染菌。阀门渗漏也会使带菌的空气或水进入发酵罐而造成染菌。 设备上的漏隙如果肉眼能看见，容易发现，也容易治理；但有的微小泄漏，肉眼看不见，必须通过一定的试漏方法才能发现 。 发酵染菌及其防治 试漏方法可采用水压试漏法。即被测设备的出口处装上压力表，将水压入设备，待设备中压力上升到要求压力，关闭进出水，看压力有否下降。压力下降则有渗漏。但有些渗漏很小，看不出何处漏水，可以用稀碱溶液压入设备，然后用蘸有酚酞的纱布揩，只要酚酞能变红处即为渗漏处。 阀门渗漏可以用集气桶来试漏。方法是先在集气桶中装满水，然后关闭所有阀门，向发酵罐中通入空气，使罐压上升到要求压力，一般一公斤以上。由于集气桶连通各管道，观察哪根管子冒泡，即这根管子的阀门漏气。 发酵染菌及其防治 发酵染菌及其防治 3、防止培养基灭菌不彻底 培养基灭菌前含有大量杂菌，灭菌时如果蒸汽压力不足，就达不到要求的温度；灭菌时产生大量泡沫或发酵罐中有污垢堆积，就会窝藏大量杂菌，造成灭菌不彻底。 培养基和水的传热系数比空气的传热系数大，如果灭菌时升温太快，培养基急剧膨胀，发酵罐内的空气排出较慢，就会产生大量泡沫，泡沫上升到发酵罐顶，泡沫中的耐热菌就不能与蒸汽直接接触，未被杀死。 防止方法： 缓慢开启蒸汽阀门，或加入少量消泡剂。 灭菌时还会因设备安装或污垢堆积造成一些“死角”。 发酵染菌及其防治 4、防止空气引起的染菌 空气过滤除菌设备流程 空压机 储罐 二级冷却 加热器 空气过滤 粗过滤 发酵染菌及其防治 空气冷却器的列管穿孔泄露，冷却水会渗入到空气中，造成染菌。 棉花-活性炭过滤器长期使用后，棉花和活性炭的体积被压缩而松动，如果上下端棉花铺得厚薄不均，厚的一边阻力大空气不畅通，薄的一边空气容易通过，久而久之，薄的一边长期受空气顶吹而使棉花活性炭改变位置，造成过滤器失效。 过滤器用蒸汽灭菌时，若被蒸汽冷凝水润湿就会降低或丧失过滤效能，灭菌完毕应立即缓慢通入压缩空气，将水分吹干。 发酵染菌及其防治 超细纤维纸作过滤介质，灭菌时必须将管道中冷凝水放干净，以免介质受潮失效。 在生产实践中，空气管道大多与其它物料管道相接，要装上止逆阀防止其它物料窜入空气管道污染过滤器，导致过滤介质失效。 发酵染菌及其防治 5、防止操作不当染菌 6、防止噬菌体污染 发酵过程中如果受噬菌体的侵染，一般发生溶菌，随之出现发酵迟缓或停止，而且受噬菌体感染后，往往会反复连续感染，使生产无法进行，甚至使种子全部丧失。 发酵染菌及其防治 染噬菌体表现为： 1、镜检可发现菌体数量明显减少，菌体不规则，严重时完全看不到菌体，且是在短时间内菌体自溶。 2、发酵pH值逐渐上升，4~8小时之内可达8.0以上，不再下降。 3、发酵液残糖高，有刺激臭味，粘度大，泡沫多。 4、生产量甚少或增长缓慢或停止 有无染噬菌体，根本的要做噬菌斑检验 发酵染菌及其防治 * 发酵染菌及其防治 什么是染菌？ 发酵过程中除了生产菌以外，还有其它菌生长繁殖 一、染菌的影响 发酵过程污染杂菌，会严重的影响生产，是发酵工业的致命伤。 造成大量原材料