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医学课件 组织学与胚胎学 ( histology and embryology ) 第一章：组织学绪论 组织学的定义和研究内容 石蜡切片、HE染色 组织化学和免疫组织化学 细胞培养与组织工程 组织和器官 光学显微镜术和电子显微镜术 原位杂交 组织学的学习方法 组织学的定义和研究内容 是研究人体的微细结构及其相关功能的一门科学，内容主要包括细胞、基本组织和器官组织。组织学又称显微镜解剖学或微细解剖学。 组织、器官和系统 组织 ：形态结构和生理功能相同或相似的细胞和细胞间质构成的具有一定形态结构和一定生理功能的细胞群体，称为组织。构成人体的基本组织有4种，称四大基本组织，即上皮组织、结缔组织、肌肉组织和神经组织。 器官：由四大基本组织按着一定的规律组成的、具有一定形态结构和生理功能的结构，称为器官。人体内有若干器官，如胃、心、肺、肾、肝、脾等。 系统：结构和功能相关的一些器官，相互协同、相互制约，共同完成某一方面的系列功能，称为系统。 组织学的研究方法和技术 普通光镜组织标本的制备方法 光学显微镜术 电子显微镜术 组织化学技术 组织培养术与组织工程 组织和细胞的定量术 普通光镜组织标本的制备方法 制备能使光线透过的组织切片是组织学研究的基本方法，主要包括固定、包埋和切片、染色等步骤。 组织学中最常用的染色方法是苏木精和伊红染色法，简称HE染色法。 染色 目的：使组织切片着色,便于观察。 碱性染料：含氨基、二甲氨基等碱性助色团的染料。 酸性染料：含有羧基、羟基、磺基等酸性助色团的染料。 染色 嗜碱性：易被碱性染料着色 嗜酸性：易被酸性染料着色 中　性：与两种染料的亲和力都不强 特殊染色 普通光学显微镜术 　　　　　　 应用普通光镜观察组织切片是组织学研究的主要技术。 光镜的分辨率是指在光镜下所能分辨的两点间的最短距离，约为0.2 μm。分辨率决定图像的清晰度和细微度 。 特殊光学显微镜 荧光显微镜 　用于观察组织、细胞中有自发荧光、诱发荧光或经荧光染料染色或标记的结构。 相差显微镜 　主要用于观察体外培养中活细胞的形态结构。 激光共聚焦扫描显微镜 　可对细胞内部非侵入式光学断层扫描成像，可进行一系列亚细胞水平的结构和功能研究 。 激光共聚焦扫描显微镜 激光共聚焦扫描显微镜图像 CLSM显示上皮细胞 电子显微镜 透射电镜术Transmission electron microscopy，TEM 是用电子束穿透标本，经过电磁场的会聚、放大后，在荧光屏上显像，或将影像投射到照相底片。 由于电子束穿透力弱，故经过固定的电镜标本需制成超薄切片（50～80 nm） ，并用重金属盐如柠檬酸铅和醋酸铀等染色。 扫描电镜术 Scanning electron microscopy，SEM 用于观察细胞、组织和器官表面的立体细微结构。 需将小块组织经固定、脱水、干燥后，在其表面喷镀薄层碳膜和金属膜。 图像清晰，富有立体感 。 电镜扫描图 肺巨噬细胞吞噬大肠杆菌 电镜图（冷冻蚀刻） 组织化学和细胞化学技术 是应用化学反应及物理反应原理，检测组织和细胞内某种化学成份并进行定位定量和细胞功能分析的一种实验技术，如用过碘酸——Schiff反应检测多糖，用脂溶性染料显示脂类，用酶化学染色显示某种酶，用孚尔根反应显示DNA。 PAS染色示肝糖元 PAS染色 免疫组织化学和免疫细胞化学技术 是应用免疫学原理，通过抗原与抗体的特异性结合，显示组织内和细胞内的抗体或抗原成份。这种检测技术的特异性强、灵敏度高、应用广泛，是生物学和医学领域中的重要研究手段。通常需对已知抗原或抗体进行标记，用相应的显色和观察方法检测目的抗体或抗原。常用的标记物有荧光素、铁蛋白、辣根过氧化物酶等。 免疫组织化学 核酸分子杂交技术 是用标记的RNA或DNA探针检测RNA或DNA片段的一种重要方法。用核酸杂交技术检测细胞内某一基因在染色体上的定位，称染色体原位杂交。用核酸杂交技术检测某一基因的转录物mRNA的细胞定位和转录状况，称细胞原位杂交。 细胞培养技术 是将离体细胞或组织放置在适当的环境条件下进行培养的一种技术方法，可用以检测各种理化因子、细胞因子等对细胞增殖、分化、代谢、运动、吞噬、分泌等生命活动和细胞行为的影响，还可用细胞培养技术研究细胞癌变、逆转的机制。 子宫内膜上皮细胞 流式细胞术 应用流式细胞仪对单个细胞进行生物化学和生物物理特性的快速定量测定，可进行细胞周期各时相细胞的比例和细胞内DNA、RNA、蛋白质的含量分析，淋巴细胞亚群的分离和定量，血细胞增殖情况的分析，杂交细胞等的分选等。 其工作原理是分离被检细胞，制成悬液，并进行荧光染色或标记，然后使单细胞液流快