治疗性单克隆抗体电荷异质性分析方法比较-药物分析杂志.PDF

药物分析杂志 Chin J Pharm Anal 2017,37(8) ·1383· 治疗性单克隆抗体电荷异质性分析方法比较* 王文波 武刚 于传飞 张峰 刘春雨 李萌 陈伟 郭莎 高凯 王兰** ， ， ， ， ， ， ， ， ， （中国食品药品检定研究院单克隆抗体产品室，卫生部生物技术产品检定及标准化重点实验室，北京100050 ） 摘要　目的：对4 种常用的单抗电荷异质性分析方法进行比对研究。方法：以重组抗TNF α全人源单克 隆抗体为例，分别利用离子交换色谱（IEC ）、毛细管区带电泳（CZE ）、毛细管等电聚焦电泳（CIEF ）和成像 毛细管等电聚焦电泳（iCIEF ）4 种方法对该抗体的电荷异质性进行分析；利用CIEF 和iCIEF 2 种方法对 抗体主峰等电点（pI ）进行分析。结果：4 种方法能够对重组抗TNF α全人源单克隆抗体的电荷异构体进 行有效的分离和定量，其中IEC 和CZE 2 种方法检测的电荷异构体峰面积百分比（酸性峰、主峰和碱性峰） 较为一致，4 种方法检测的碱性峰比例较一致，CIEF 和iCIEF 检测的主峰与酸性峰比例较其他方法偏高。 CIEF 和iCIEF 检测抗体主峰等电点具有一定差异，其中，聚焦时间长短和pI Marker 的选择是影响单抗pI 值检测的主要因素。结论：通过抗体电荷异质性分析方法的比较研究可见，在单抗电荷异构体比例和主峰 pI 测定上4 种方法具有一定的差异。对单抗的质控应结合产品特性和表征研究，合理选择电荷异质性分 析方法。 关键词：单克隆抗体；电荷异质性；等电点；质量控制；毛细管电泳；离子交换色谱 中图分类号：R 917　　　文献标识码：A　　　文章编号：0254-1793 （2017 ）08-1384-06 doi ：10.16155/j.0254-1793.2017.08.06 Comparative study of different analytical methods for the * charge heterogeneity analysis of therapeutic antibody WANG Wen-bo ，WU Gang ，YU Chuan-fei ，ZHANG Feng ，LIU Chun-yu ， ** LI Meng ，CHEN Wei ，GUO Sha ，GAO Kai ，WANG Lan （National Institutes for Food and Drug Control ，Key Laboratory of the Ministry of Health for Research on Quality and Standardization of Biotech Products ，Beijing 100050 ，China ） Abstract　Objective ：To analyze charge heterogeneity of monoclonal antibody by four widely used analytical methods．Methods ：Ion exchange chromatography （IEC ），capillary zone ectrophoresis （CZE ），capillary isoelectric focusing （CIEF ） and imaged capillary isoelectric focusing （iCIEF ） were used to analyze the charge heterogeneity of the recombinant anti-TNF α fully human monoclonal antibody．