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.基因工程的基本工具 本节重点 2 DNA 重组技术所需的三种基本工具的作用 1 基因工程的概念 3 基因工程运载体需要具备的条件 基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,并通过体外DNA重组和转基因等技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,因此又叫做DNA重组技术。 转鱼抗寒基因的番茄 乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷) 基因工程的别名 操作环境 操作对象 操作水平 基本过程 实质 结果 基因拼接技术或DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 人类需要的基因产物 剪切 → 拼接 → 导入 → 表达 基因重组 基因工程的概念 基础理论和技术的发展催生了基因工程 20世纪中叶,基础理论取得了重大突破 DNA是遗传物质的证明 DNA双螺旋结构和中心法则的确立 遗传密码的破译 技术发明使基因工程的实施成为可能 基因转移载体的发现 工具酶的发现 DNA合成和测序技术的发明 DNA体外重组的实现 重组DNA表达实验的成功 第一例转基因动物问世 PCR技术的发明 科学、技术、社会的关系 科学提供对自然界的说明,技术将科学原理转化为工艺和产品,从而造福于人类社会。科学、技术、社会的互动,不断调整着人类与自然界的关系,推动着文明的进展。 转基因抗虫棉 抗虫棉 普通棉 基因工程培育抗虫棉的简要过程: 普通棉花(无抗虫特性) 苏云金芽孢杆菌 提取 抗虫基因 与运载体DNA拼接 导入 棉花细胞(含抗虫基因) 棉花植株(有抗虫特性) 上述培育抗虫棉的关键步骤是什么? 基因工程培育抗虫棉的关键步骤: 关键步骤一: 抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来 关键步骤二: 抗虫基因与运载体DNA连接 关键步骤三: 抗虫基因导入受体(棉花)细胞 解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具? 关键步骤一的工具: 关键步骤二的工具: 关键步骤三的工具: 基因的剪刀——限制性内切酶 基因的针线——DNA连接酶 基因的运载工具——运载体 DNA 重组技术的基本工具 本节知识内容 §1 DNA重组技术的基本工具 专题一 基因工程 a“分子手术刀” ──限制酶 b“分子缝合针” ──DNA连接酶 c“分子运输车” ──基因进入受体细胞的载体 识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 主要是从原核生物中分离纯化出来的一种酶。 4000种。 1、来源: 2、种类: 3、作用: 4、结果: 切口末端 一、 “分子手术刀” ——限制性核酸内切酶 中轴线两侧 平末端 将DNA分子切割成为两个切口末端相同的片段。 特定的核苷酸序列特征(中轴线) 黏性末端 沿中轴线 大肠杆菌(E.coli)的一种限制酶能识别GAATTC序列,并在G和A之间切开。 限制酶 什么叫黏性末端? 限制酶 什么叫黏性末端? 什么叫黏性末端? 被限制酶切开的DNA两条单链的切口,带有几个伸出的核苷酸,他们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。 什么叫平末端? 当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时,切开的DNA两条单链的切口,是平整的,这样的切口叫平末端。 二、 “分子缝合针” —— DNA连接酶 1、种类: 2、作用部位: 两类 E·coli DNA连接酶 T4 DNA连接酶 磷酸二酯键 DNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来,即把梯子两边扶手的断口连接起来,这样一个重组的DNA分子就形成了。 A A T T G C C T T A A G
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