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课件:ABO血型鉴定2.ppt
ABO血型和RH血型鉴定 永昌县计划生育服务站 孙晓玲 ABO血型鉴定 一、 [器材] 1、采血针:市售一次性使用的采血针,刺血深度可加控制。 2、消毒干棉球。 3、75%乙醇棉球。 4、一次性使用的20uL刻度采血管。 二、鉴定方法 生理盐水凝集法:①玻片法:操作简单,适于大量标本检查,但反应时间长;被检查者如血清抗体效价低,则不易引起红细胞凝集,因此,不适于反向定型。②试管法:由于离心作用可加速凝集反应,故反应时间短,而且借助于离心力可以使红细胞接触紧密,促进凝集作用,适于急诊检查。 三、[操作] 1、采血部位成人以左手无名指为宜。(半岁以上儿童以手指采取为好,半岁以下婴幼儿通常自拇指或足跟两侧采血 2、轻轻按摩采血部位,使其自然充血,75%乙醇棉球消毒局部皮肤、待干 3、紧捏刺血部位,用无菌刺血针穿刺取血。动作应迅速,深度为2-3mm。稍加挤压,以血液流出为宜。 4、用干棉球擦去第一滴血,用一次性使用的20uL刻度采血管采血20uL滴于玻片一端,同样在玻片另一端滴血20uL。 5、滴加ABO血型鉴定试剂。 加试剂抗体血清 加被检红细胞悬液 相对应的抗原抗体反应 观察结果 ABO血型判断 血 正定型 反定型 型 抗-A 抗-B AC BC OC A + — — + — B — + + — — O — — + + — AB + + — — — 五、.注意事项 一般注意事项: ①所用器材必须干燥清洁、防止溶血。为避免交叉污染,建议使用一次性器材。标准血清从冰箱取出后,应待其平衡至室温后再用,用完后应尽快放回冰箱保存。 ②加试剂顺序:一般先加血清,然后再加红细胞悬液,以便核实是否漏加血清。 ③虽然IgM抗A和抗B与相应红细胞的反应温度以4℃最强,但为了防止冷凝集现象干扰,一般在室温20℃~24℃内进行试验,而在37℃条件,可使反应减弱。 ④幼儿红细胞抗原未发育完全、老年体弱者抗原性较弱,最好采用试管法鉴定血型。 ⑤玻片法反应时间不能少于10min,否则较弱凝集不能出现,造成假阴性。 ⑥正、反定型结果一致才可发报告。 ⑦反定型法:先天性免疫球蛋白缺陷,长期大量应用免疫抑制剂,血型抗体可减弱或消失;血清中存在自身免疫性抗体、冷凝集素效价增高、多发性骨髓瘤、免疫球蛋白异常均可造成反定型困难;新生儿体内可存在母亲输送的血型抗体,且自身血型抗体效价又低,因而出生6个月以内的婴儿不宜做反定型。老年人血清中抗体水平大幅度下降或被检者血清中缺乏抗A及(或)抗B抗体,可引起假阴性或血型鉴定错误。 RH血型 RH的由来 RH是恒河猴(Rhesus Macacus)外文名称的头两个字母。1940年,兰德斯坦纳等科学家在用恒河猴的红细胞免疫豚鼠和家兔,结果在豚鼠和家兔身上获得了一种免疫血清,这种血清不但能凝集恒河猴的红细胞,也可以与部分人的红细胞产生凝集反应,也就是说这些人的红细胞跟恒河猴的红细胞有一个共同的抗原点,故而以恒河猴的字头缩写命名。 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 RH血型的分类 RH血型系统,其中含有6种抗原,即C、c、D、d、E、e。凡人体血液红细胞含D抗原(又称RH抗原)为RH阳性,否则为阴性。这样就使已发现的红细胞A、B、O及AB四种主要血型的人,又都分别一分为二地被划分为RH阳性和阴性两种。随着对RH血型的不断研究,认为RH血型系统可能是红细胞血型中最为复杂的一个血型系。RH血型无天然抗体,其抗体多由输血(RH阴性者被输人RH阳性血液)或妊娠(RH阴性母亲孕育着RH阳性胎儿)免疫生成,具有重要临床意义。一旦形成抗体,如再输入RH阳性血液,可发生严重输血反应。再孕育RH阳性胎儿可发生新生儿溶血症。
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