课件：第九章血脂及血浆脂蛋白检验PPT课件.ppt

* 昆明市卫生学校 检验专业 生物化学检验技术 * 昆明市卫生学校 检验专业 生物化学检验技术 * 昆明市卫生学校 检验专业 生物化学检验技术 * 昆明市卫生学校 检验专业 生物化学检验技术 1．原理 含反应活性剂的试剂Ⅰ加入血清后，与HDL、VLDL和CM反应，使其胆固醇水解并与酶反应生成无色产物溶于介质中。再加入含溶解LDL的活性剂Ⅱ试剂，使LDL水解并与其中的胆固醇试剂进行偶联反应生成红色化合物，定量血清中LDL-C。 以△A=A2-A1进行运算，测出LDL-C的含量 2．试剂（第一化学） R1：去垢剂1、COD、POD、4-AAP。 R2：去垢剂2、DSBmT。 3．操作 按CL-7200型或其他型号全自动生化分析仪检测。 LDL-C检测参数 * 昆明市卫生学校 检验专业 生物化学检验技术 * 昆明市卫生学校 检验专业 生物化学检验技术 1．原理 含反应抑制剂的阴离子表面活性剂加入血清中后，与CM、VLDL和LDL紧密结合，少量与HDL结合。尔后，再加入反应促进剂的聚阴离子表面活性剂后，HDL溶化并释放出胆固醇，与胆固醇测定试剂进行反应，达到仅测出高密度脂蛋白-胆固醇（HDL-C）的目的，其反应全过程为： 2．试剂（第一化学） RⅠ：前处理液（第一反应液） RⅡ：第二反应液（可溶性表面活性剂）及显色液 HDL-C参考血清 3．操作 按双试剂双波长法在CL-7200型全自动生化分析仪进行检测，有关参数如表16-1所示。 表16-1 HDL-C检测参数 * 昆明市卫生学校 检验专业 生物化学检验技术 * 昆明市卫生学校 检验专业 生物化学检验技术 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 * 昆明市卫生学校 检验专业 生物化学检验技术 （一）化学测定法 化学测定法通常需抽提纯化。显色剂主要有两类： ①醋酐-硫酸，②高铁硫酸，③邻苯二甲醛 这些显色反应须用强酸试剂，干扰因素多，准确 测定有赖于从标本中抽提、皂化、纯化过程，因而操 作较繁，不适于分析大批量标本，且不适于自动分析。 特点： * 昆明市卫生学校 检验专业 生物化学检验技术 (二)酶测定法 特点： 常规测定中现已广泛应用酶法，酶法具有特异性好，精密度和灵敏度都能很好地满足临床实验室的要求，既可以手工操作，也适合自动分析，但酶法测定中出现了不同程度的基质效应。 采用酶反应原理的比化学法颇为实用，其缺点是价格高，精密度差。胆固醇的酶测定法始于70年代。由于操作简便，试剂无腐蚀性，特别适用于自动生化分析，目前已成为测定胆固醇的主要方法。 * 昆明市卫生学校 检验专业 生物化学检验技术 CEH-COD-POD法 原理： 胆固醇脂＋H2O 胆固醇＋游离脂肪酸 胆固醇＋O2 胆烷-4-烯-3-酮＋H2O2 H2O2＋4-AAP＋酚 醌亚胺＋H2O 胆固醇酶测定法的试剂中，除了上述三种酶、酚和4-氨基安替比林外，还有维持pH恒定的缓冲液、胆酸钠、表面活性剂以及稳定剂等。胆酸钠是为了提高胆固醇酯酶的活性，表面活性剂的作用是促进胆固醇从脂蛋白中释放出来 * 昆明市卫生学校 检验专业 生物化学检验技术 评价： 主要缺点是： 优点：本法灵敏度高、准确度高、精密度好，线性范围宽。 ①某些胆固醇酯酶对胆固醇酯的水解不完全，不能用纯胆固醇结晶以有机 溶剂配制的溶液作为TC分析的校准液，而应以准确定值的血清作为标准， 此校准液（品）相当于三级标准。 ②表面活性剂，如吐温-40可以干扰胆固醇酯酶的作用，而聚乙烯醇6000 可使结果提高1％～2％； ③本法具有氧化酶反应途径的共同缺陷，易受到一些还原性物质如尿酸、胆红素、维生素C和谷胱甘肽等的干扰。 * 昆明市卫生学校 检验专业 生物化学检验技术 【参考值】 血清总胆固醇合适范围： ≤5.20mmol/L (200mg/dl)， 边缘升高：5.23～5.69mmol/L(201～219mg/dl)， 升高：≥5.72mmol/L (220mg/dl)。 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 * 昆明市卫生学校 检验专业 生物化学检验技术 影响TC水平的因素 ①年龄与性别； ②长期的高胆固醇、高饱和脂肪酸和高热量饮食可使TC增高； ③遗传因素； ④其它：如缺少运动、脑力劳动、精神紧张等可能使TC升高。 TC除了作为高胆固醇血症的诊断指标之外，不能作为其它任何疾病的诊断指标，对于动脉粥样硬化和冠心病而言，TC是一个明确的危险因子，与冠心病的发病率呈正相关。 【临床意义】 高TC血症：原发和继发 低TC血症：原发和继发 * 昆明市卫生学校 检验