课件：第章骨代谢异常的生物化学诊断.ppt

THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 * （二）Ⅱ型骨质疏松症 中老年人骨的吸收大于骨形成，导致骨质疏松 细胞学基础：破骨细胞的吸收增加 成骨细胞功能衰减 主要由于老年人身体各机能退化而致 骨形成与骨吸收的生化指标均有降低倾向 返回章目录 * 第三节 血清钙磷镁的测定 * 一、血清钙的测定 （一）血清钙测定方法概述——总钙测定 标 本：血清或低浓度肝素抗凝血浆 测定方法：滴定法、比色法、火焰光度法、 原子吸收分光光度法、同位素稀释质谱法等 决定性方法：同位素稀释-质谱法 （IFCC） 参考方法：原子吸收分光光度法 （IFCC） 常规方法：邻甲酚酞络合酮（O-CPC）法 （卫生部） * （二）血清钙测定方法概述——离子钙测定 标 本： 血清、低浓度肝素抗凝血浆或全血 测定方法：生物学法、透析法、超滤法、 金属指示剂法、ISE法等 参考方法： ISE法 * （三）血清钙测定——总钙测定——O-CPC 法 1. 测定原理 （总）钙 O-CPC 紫红色螯合物（575nm） pH10 8-羟基喹啉 2. 方法评价 操作简便、快速、稳定，同时适于手工和自动化分析 反应体系的pH值对结果影响较大 * （四）血清钙测定——离子钙测定——ISE 法 1. 测定原理 Nernst方程式：在一定条件下，ISE的电位与溶液中的被测离子浓度的对数成正比 2. 方法评价 操作简便、快速、重复性好 准确度和敏感性高，影响因素少 * 二、血清磷的测定 （一）血清磷测定方法概述 标 本：血清、肝素化血浆 常用方法：磷钼酸还原法、磷钼酸紫外分光光度法、酶法、原子吸收分光光度法、同位素稀释质谱法等 决定性方法：同位素稀释质谱法 常规方法：磷钼酸紫外分光光度法、磷钼酸还原法 * （二）血清磷测定——磷钼酸还原法 1. 测定原理 无机磷 钼酸铵 磷钼酸复合物 钼蓝（650nm） 硫酸亚铁 或米吐尔 2. 方法评价 方法简便、快速，稳定 体系中加入Triton X-100等表面活性剂，则不需要除蛋白即可直接测定 * （三）血清磷测定——酶法 1. 测定原理 次黄嘌呤核苷 嘌呤核苷磷酸化酶 次黄嘌呤 黄嘌呤氧化酶 H2O2尿酸 无机磷 Trinder反应 2. 方法评价 血清磷测定的发展方向 显色稳定，线性范围宽，干扰因素小，可用于自动化分析 所用的酶试剂比较贵 * 三、血清镁的测定 （一）血清镁测定方法概述 标 本：血清（ 非钙离子络合抗凝剂） 测定方法：比色法、原子吸收分光光度法、酶法、 同位素稀释质谱法等 决定性方法：同位素稀释质谱法 参考方法：原子吸收分光光度法 常规方法：甲基麝香草酚蓝（MTB）比色法 Calmagite染料结合法 * （二）血清镁测定——比色法 1. 测定原理 镁离子 MTB EGTA掩蔽钙离子 蓝紫色复合物（600nm） 2. 方法评价 方法简单、实用，可用于自动化分析 采血后应尽快分离血清，而且避免溶血 EGTA(乙二醇二乙醚二胺四乙酸 EGTA：乙二醇二乙醚二胺四乙酸 * （三）血清镁测定——酶法 1. 测定原理 异柠檬酸 α-酮戊二酸 NADP+ NADPH （340nm处吸光度下降） 镁离子，ICD 2. 方法评价 成本低廉、影响因素小，线性范围宽 试剂稳定性欠佳，4℃下只能保存2周左右 返回章目录 * 第四节 骨代谢异常的生物化学测定 * 一、骨代谢调节激素的测定 （一）甲状旁腺素的测定 1. 测定方法概述 存在形式：PTH-N、PTH-C和PTH-M 测定形式：PTH-C、PTH-M和完整PTH 主要方法： RIA、IRMA、ELISA、ICMA等 国外采用IRMA法和ICMA法测定完整的PTH分子 国内应用最普遍的是RIA法 * 　IRMA：免疫放射法 　ICMA：免疫化学发光法 2. RIA法测定PTH 测定对象：PTH-M和PTH-C 方法类型：竞争性RIA法 125I 标记PTH-M和PTH-C 125I标记的PTH-M和PTH-C与病人样本中的PTH- M和PTH-C竞争抗体结合位点。 * （二）维生素D的测定 1. 测定方法概述 25-(OH)D3是反映机体维生素D营养状态的理想指标 1,25-(OH)2D3更适合用受体结合法进行分析 25-(OH)D3的测