课件：第九章血脂及血浆脂蛋白检验.ppt

实验步骤 自动分析参数 反映类型：终点法： 温度：37℃ 波长：340nm 单位：mg/L 校准：5点定标 校准类型：非线形 参考范围 300 mg/L 【注意事项】 轻微黄疸、乳糜血、溶血对结果无影响。 【临床意义】 血清Lp(a)水平是冠心病、脑血管疾病的独立危险因素，因为它与高血压、吸烟、高VLDL-C、低HDL-C等因素无明显关系。 Lp（a）300mg/L时，冠心病发病率高于正常健康人2~5倍： 脑动脉硬化病变形成中，Lp(a）不仅显著高于健康人，而且与病变的程度密切相关。 在动脉粥样硬化病变邢成中,Lp（a）与ApoB起协同作用。 冠状动脉搭桥手术中，高Lp（a）易于引起血管再狭窄。 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 概述 低密度脂蛋白（LDL）由极低密度脂蛋白（VLDL）在血浆 中转变而来，是空腹血浆中含量最多的脂蛋白，约占脂蛋白 总量的1/2以上。 LDL中的胆固醇占血浆胆固醇总量的60%~70%,其中胆固醇 酯占4/5，故有血浆低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）之称。 测定方法 LDL-C测定没有决定性方法。 目前多采用聚乙烯硫酸（PVS）沉淀法 聚乙烯硫酸（PVS）沉淀法 空腹血清中主要含有HDL、LDL、VLDL。 用聚乙烯硫酸盐-聚乙二醇甲醚选择性地沉淀LDL，离心后上清 液中韩HDL、VLD测定出上清液HDL-C和VLDL-C总和。同时测定 血清总胆固醇含量。 LDL-C = TC -（HDL-C + VLDL-C） 实验操作 LDL分离 于小离心管中加血清200uI和沉淀剂100uI，混匀， 室温（20 ℃，不得高于30℃ ）放置15min，然后3000rpm离心 15min，取上清液与血清同时测定胆固醇。 取3支试管，按下表操作 加入物（ml） 标准管 测定管1 测定管2 空白管 标准液 0.03 -- — — 上清液 -- 0.03 -- — 血清 -- -- 0.03 -- 蒸馏水 -- 酶试剂 2.00 -- 2.00 -- 2.00 0.03 2.00 混匀，置于37℃水浴箱，放置5分钟，以空白管调零点，在 500nm波长处进行比色，分别读取各管的吸光度。 计算 测定管1吸光度 上清血清胆固醇浓度= -----------------------× 胆固醇标准液浓度 标准管吸光度 测定管2吸光度 总胆固醇浓度= -----------------------× 胆固醇标准液浓度 标准管吸光度 上清LDL-C = TC - 上清液胆固醇浓度 参考范围 40岁以上成人 2.70~3.10 mmol/L 合适水平 3.36 mmol/L 危险水平 4.41 mmol/L 【临床意义】 LDL-C水平与冠心病的发病率呈正相关 LDL-C增高是动脉粥样硬化发生发展的主要脂类危险因素 由于TC水平同时也受HDL-C水平的影响，所以最好以LDL-C代替TC作为冠心病危险因素指标。 临床上以LDL-C水平作高脂蛋白血症的治疗决策及其需要达到的治疗目标。 简介 ApoAⅠ 是HDL的主要结构蛋白 约占HDL蛋白总量的64% ApoB100 是LDL的主要结构蛋白 约占LDL蛋白总量的95% 因此， ApoAⅠ和 ApoB100 可以直接反映HDL和LDL的含量。 血清载脂蛋白测定 免疫化学法： 单向免疫扩散（RID） 电免疫分析（如火箭电泳法） 放射免疫分析（RIA） 酶联免疫吸附分析（ELISA） 免疫浊度法等 早期 目前： 目前比较适合于临床实验室的是免疫浊度法，包括 免疫散射比浊法（INA）和免疫透射比浊法（ITA）。 免疫透射比浊法 原理 光线通过特异性抗原抗体复合物溶液时被吸收和散射， 使透射光减弱，其减弱程度与免疫复合物含量成正比，即与 抗原含量成正比。 试剂与器材 1、磷酸盐氯化钠缓冲液 2、200g/L 聚乙二醇磷酸盐缓冲液 3、40g/L 聚乙二醇磷酸盐缓冲液 4、8mol/L 尿素溶液 5、抗血清 6、器材 试管、刻度吸管、微量加样器、分光光度计、 离心机 ApoAⅠ测定实验操作 1、稀释抗血清 2、稀释血清标本 用尿素做1：